[发明专利]用于单层细胞平铺的人工基质

说明书

本案涉及用于单层细胞平铺的人工基质，至少包括有缓冲基液、牛血清白蛋白、糖源、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮和明胶；其中，所述缓冲基液选自PBS缓冲液、Tris‑HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液和NaCl水溶液中的一种；所述糖源选自蔗糖、海藻糖、甘露糖或其组合。本案通过对现有人工基质缓冲液的配方改进，可以使血液中的细胞或者实验室培养细胞在经过预处理(如染色液或荧光标记处理)后，在加入本案人工基质后，可以更好实现细胞在载玻片或类似的载玻片平面结构的单层平铺，以利于光学显微镜或者荧光显微镜(预期为自动化扫描判读装置)进行观察，提高检查结果的准确性。

技术领域

本发明属于细胞平铺缓冲系统，特别涉及一种适用于单层细胞平铺的人工基质。

背景技术

细胞是人体最重要，最基础的组成部分，其状态优劣常与人体健康存在直接关系。常用来进行细胞分析的仪器设备主要流式细胞仪、血细胞分析仪或荧光显微镜等。利用流式或血细胞检测仪器进行细胞分析的原理是依赖细胞自身的物理或化学特性(比如大小、折射率、形态等)的不同，细胞在分析前需要制备成悬液，分析过程中细胞需要在鞘液的配合下依次通过检测单元，记录每个细胞的参数后，进行适当的统计分析，进而用于疾病的检测或健康评估。

显微镜是一种用于观察生物微观世界的重要工具，在生物健康领域其应用十分广泛，例如利用光学显微镜对染色后的血液进行观察可用于疾病的诊断、使用激光光聚焦扫描显微镜可以对病变细胞表面特异性标志物的有无以及含量进行测定、利用STED显微镜可以对细胞表面纳米级微结构进行成像观测等。

显微镜的应用十分广泛，其应用时的测试对象需要为一个平面载体，一般为载玻片，或者形状类似载玻片的平面结构。使用显微镜进行细胞分析时常需要将细胞平铺在平面载体上，保持细胞的固定状态，才能用于进一步的观察。例如在使用显微镜对血涂片进行观察前，需要制备具有单层细胞分布的血涂片，进入血涂片干燥形成血膜后才能使用瑞特染色液等进行染色，染色也相对复杂需要经过几次加染料、冲洗和再加染料再冲洗的过程。而最终观察的具有单层细胞分布的区域其大小只占血膜的很小部分，由于细胞的重叠其它部分无法观察，其获得的生物信息也相对有限。众所周知，对于统计分析获得的结果而言，其样本量越大结果也越准确。因此，如果能够减少重叠细胞，形成更多便于观察的的单层细胞，对检查结果的准确性而言将大大提升。

在制备单层细胞时过程中需要从多个方面综合考虑才能制备出适合于显微观察的优质玻片。例如细胞所处的缓冲液离子条件(即人工基质)，可直接影响细胞形态，不佳的缓冲液甚至可以导致细胞破碎从而无法观察；又例如细胞在缓冲液中的固定程度，如果细胞漂浮在缓冲液中，往往使自动化图像观察变得十分困难，影响成像效果；再例如细胞所处的缓冲液干燥后的结晶状况，由于单层细胞的所形成膜十分薄，可在几分钟内干燥，随之伴随的是大量结晶盐的析出，对后期观察尤其是荧光成像效果的观察将产生极大影响等等。

由于上述问题的存在，制备一种可用于细胞单层分布平铺的缓冲液人工基质显得尤为重要。

发明内容

针对现有技术中存在的细胞易聚团、易结晶以及细胞形态易改变甚至破裂等问题，本案的目的在于提供一种适用于单层细胞平铺的人工基质，来有效避免细胞聚团、结晶，保护细胞形态，利于后续观察和结果判读。

为实现上述目的，本案通过以下技术方案实现：

一种用于单层细胞平铺的人工基质，其至少包括有缓冲基液、牛血清白蛋白、糖源、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮和明胶；

其中，所述缓冲基液选自PBS缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液和NaCl水溶液中的一种；

所述糖源选自蔗糖、海藻糖、甘露糖或其组合。

优选的是，所述的用于单层细胞平铺的人工基质，其中，以质量分数为计，所述牛血清白蛋白的浓度为1-8％。