[发明专利]一种花生转录因子AhJ11-FAR1-5基因的克隆及功能表达方法有效
| 申请号： | 201611019808.X | 申请日： | 2016-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN107058334B | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 赵小波;李春娟;单世华;张廷婷;闫彩霞;王娟 | 申请（专利权）人： | 山东省花生研究所 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/10;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266000 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 花生 转录 因子 ahj11 far1 基因 克隆 功能 表达 方法 | ||
1.一种花生转录因子AhJ11-FAR1-5基因在提高花生抗干旱胁迫中的用途，其特征在于：所述AhJ11-FAR1-5基因开放阅读框为2727bp，共编码908个氨基酸，AhJ11-FAR1-5基因的核苷酸序列是序列表中SEQUENCE1,AhJ11-FAR1-5基因的氨基酸序列是序列表中SEQUENCE2，将所述AhJ11-FAR1-5基因通过转基因技术导入花生中，用于提高花生的抗旱性。
2.根据权利要求1所述花生转录因子AhJ11-FAR1-5基因在提高花生抗干旱胁迫中的用途，其特征在于：使用荧光定量RT-PCR对转录因子AhJ11-FAR1-5基因干旱下的表达进行分析，其方法如下：
将荧光定量RT-PCR所用cDNA模板稀释到8ng/μL，采用SYBR Green聚合酶；
PCR反应程序如下：(a)95℃，10s；(b)95℃，5s；(c)60℃，30s；(d)72℃，10s；40个循环；绘制溶解曲线，温度增加梯度为每10s增加0.5℃，RT-PCR的内参基因为Actin。
3.根据权利要求2所述花生转录因子AhJ11-FAR1-5基因在提高花生抗干旱胁迫中的用途，其特征在于：荧光定量RT-PCR用的引物序列为：AhJ11-FAR1-5-R：5’-AGGACTACTTCAAGATGTG-3’和AhJ11-FAR1-5-F:5’-GCTGTTACTTCATTATTACGA-3’。
4.根据权利要求2所述花生转录因子AhJ11-FAR1-5基因在提高花生抗干旱胁迫中的用途，其特征在于：所述Actin所用引物序列为：Actin-F:5’-GAGGAGAAGCAGAAGCAAGTTG-3’和Actin-R:5’-AGACAGCATATCGGCACTCATC-3’。
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