[发明专利]一种柠檬的组培快繁方法有效
申请号: | 201611023381.0 | 申请日: | 2016-11-21 |
公开(公告)号: | CN108077069B | 公开(公告)日: | 2021-03-30 |
发明(设计)人: | 李飞;张卉;程帅;邓亨宁;雷琼 | 申请(专利权)人: | 蒲江橙海阳光农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 王学强;罗满 |
地址: | 611630 四川省成都市蒲*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 柠檬 组培快繁 方法 | ||
1.一种柠檬的组培快繁方法,其特征在于:所述组培快繁方法包括以下步骤:
(1)启动培养:切取柠檬枝条带芽茎段作为外植体,灭菌处理后接种到启动培养基中,培养4—5周,直至所述外植体上萌发出腋芽并生长至一定长度;
(2)增殖培养:切取步骤(1)所述腋芽,接种到增殖培养基中,培养4—6周,直至所述腋芽基部形成丛生芽并生长至一定长度;
(3)生根培养:将步骤(2)所述丛生芽切成单芽,将所述单芽接种到生根培养基中,培养4—5周,直至生根且根长至一定长度,即得柠檬组培苗;
其中,步骤(1)腋芽生长至1—4cm,步骤(2)丛生芽生长至2—5cm,步骤(3)根长至2—5cm;
步骤(1)所述启动培养基的组成为:MS基本培养基,补充5.5g/L琼脂、25g/L蔗糖、1.0mg/L 6-BA、0.2 mg/L KT、0.2mg/L NAA;
步骤(2)所述增殖培养基的组成为:MS基本培养基,补充1.0mg/L KT、0.2mg/L NAA、5.5g/L琼脂、30g/L蔗糖;
步骤(3)所述生根培养基的组成为:1/2MS基本培养基,补充0.5mg/L NAA、5.5g/L琼脂、25g/L蔗糖、0.2 mg/L IBA。
2.根据权利要求1所述的一种柠檬的组培快繁方法,其特征在于:步骤(1)所述外植体的灭菌处理为:将所述外植体用消毒液与吐温20的组合物清洗并冲洗干净后,在超净工作台上,先用75%酒精处理20—40s,无菌水清洗3—4次,再用0.1%的升汞处理8—12min,无菌水冲洗5—6次,晾干即可。
3.根据权利要求1所述的一种柠檬的组培快繁方法,其特征在于:所述启动培养、增殖培养、生根培养的条件均为:温度23—27℃,光照强度1800—2200Lx,光周期14/10h。
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