[发明专利]一种两面针再生苗的组培培养基和培养方法有效
申请号: | 201611044473.7 | 申请日: | 2016-11-24 |
公开(公告)号: | CN106508683B | 公开(公告)日: | 2018-03-20 |
发明(设计)人: | 何国振;何蔚思;汤丽云 | 申请(专利权)人: | 广州中医药大学;华南农业大学 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A01H4/00 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司44102 | 代理人: | 任重 |
地址: | 510006 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 两面针 再生 培养基 培养 方法 | ||
1.一种两面针再生苗的组培培养基,其特征在于,包括愈伤组织诱导培养基、芽分化培养基、芽增殖培养基和生根培养基;所述愈伤组织诱导培养基为MS+1.0~4.0mg/L KT+1.0~2.0mg/L NAA;所述芽分化培养基分为第一次芽分化培养基和第二次芽分化培养基,第一次芽分化培养基为MS+1.0~4.0mg/L KT+0.1~0.2mg/L IBA,第二次芽分化培养基为MS+2.0~6.0mg/L KT+0.2mg/L IBA或者MS+2.0~6.0mg/L KT+0.4~0.8mg/L NAA;所述芽增殖培养基为MS+2.0~4.0mg/L KT+0.8mg/L IBA或者MS+2.0~4.0mg/L KT+0.4~0.8mg/L NAA;所述生根培养基为1/2MS+0.2~2.0mg/L KT+1.0mg/L IBA。
2.一种两面针组织培养的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)以两面针无根苗的茎段为外植体,进行愈伤组织的诱导;所述愈伤组织诱导培养基为MS+1.0~4.0mg/L KT+1.0~2.0mg/L NAA;
(2)将愈伤组织在分化培养基中分两次进行分化培养,以得到带芽愈伤组织;所述第一次芽分化培养基为MS+1.0~4.0mg/L KT+0.1~0.2mg/L IBA,所述第二次芽分化培养基为MS+2.0~6.0mg/L KT+0.2mg/L IBA或者MS+2.0~6.0mg/L KT+0.4~0.8mg/L NAA;
(3)将带芽的愈伤组织在芽增殖培养基中培养,以获得更多的再生芽,并改善芽的质量;所述芽增殖培养基为MS+2.0~4.0mg/L KT+0.8mg/L IBA或者MS+2.0~4.0mg/L KT+0.4~0.8mg/L NAA;
(4)将所得芽从基部切下,转接到生根培养基中诱导生根;所述生根培养基为1/2MS+0.2~2.0mg/L KT+1.0mg/L IBA。
3.根据权利要求2所述两面针组织培养的方法,其特征在于,步骤(1)、(2)、(3)、(4)的培养条件均为:温度23~27℃,相对湿度40%~60%,光照强度为32.5~34.5μmol·m-2·s-1,光周期为光照与黑暗时间各半。
4.根据权利要求2所述两面针组织培养的方法,其特征在于,步骤(1)的两面针无根苗的茎段是取带腋芽的两面针的幼嫩茎段,消毒后,再接种于MS+1.0~2.0mg/L KT+0.2~0.4mg/L NAA培养长成3~4cm的无根苗,再截取无根苗的茎段即可。
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