[发明专利]一种脱细胞角膜缘保护液及脱细胞角膜缘的制备方法有效
申请号: | 201611044689.3 | 申请日: | 2016-11-24 |
公开(公告)号: | CN106614519B | 公开(公告)日: | 2019-11-19 |
发明(设计)人: | 史伟云;周庆军;董沐晨 | 申请(专利权)人: | 山东省眼科研究所 |
主分类号: | A01N1/00 | 分类号: | A01N1/00;A61L27/36 |
代理公司: | 11569 北京高沃律师事务所 | 代理人: | 王加贵<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 角膜 保护 制备 方法 | ||
1.一种脱细胞角膜缘保护液,其特征在于,其成分由5~12g/L透明质酸、5~20g/L硫酸软骨素、3~10g/L低分子右旋糖酐和2.5~5mg/L妥布霉素的PBS缓冲液组成。
2.根据权利要求1所述的脱细胞角膜缘保护液,其特征在于,所述脱细胞角膜缘保护液的pH值为7.2~7.4。
3.根据权利要求1或2所述的脱细胞角膜缘保护液,其特征在于,所述脱细胞角膜缘保护液的渗透压为300~400mOsm。
4.利用权利要求1~3任意一项脱细胞角膜缘保护液制备脱细胞角膜缘的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将含前弹力层的新鲜猪角巩膜缘基质密封于所述脱细胞角膜缘保护液中,采用高静压处理破碎细胞;
(2)将细胞破碎后的角膜缘置于添加了去垢剂和核酸酶的所述脱细胞角膜缘保护液中进行震荡脱细胞处理;
(3)将所述脱细胞后的角膜缘置于所述脱细胞角膜缘保护液中漂洗。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述高静压处理破碎细胞的条件为:压力为100~600MPa,高静压频率为2~5次,每次为1~2分钟,总时间不超过10分钟。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述去垢剂包括Triton、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠中的一种或多种。
7.根据权利要求4或6所述的制备方法,其特征在于,所述去垢剂在所述脱细胞角膜缘保护液中的浓度为0.2~0.5%。
8.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述核酸酶包括DNA酶和/或RNA酶。
9.根据权利要求4或8所述的制备方法,其特征在于,所述核酸酶在所述脱细胞角膜缘保护液中的浓度为100~2000U/ml。
10.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述震荡脱细胞处理的条件为:转速100~150转/分钟,温度20~30℃,时间2~4小时。
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