[发明专利]富马酸酯在制备治疗肝病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及化学医药领域。具体涉及富马酸酯在制备治疗多种肝脏疾病药物中的应用。

背景技术

氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时，体内高活性分子如活性氧自由基(ROS)和活性氮自由基(RNS)产生过多，氧化程度超出氧化物的清除，而导致组织损伤。肝脏作为重要的代谢器官，常暴露在较高浓度的外源物和其他化学物质中。虽然肝脏具备一系列抵御有害化学物质及其代谢产物的机制，但仍易受到中间活性物质引起的氧化损伤。氧化应激是诸多肝脏疾病共同的发病机制，氧化损伤与多数肝病密切相关，包括：脂肪性肝病、药物性肝病、胆汁淤积性肝损伤、病毒性肝炎、肝硬化，甚至于肝癌，所以抗氧化治疗对防治肝脏疾病有着重要的作用。

Nrf2是近年来新发现的一种由氧化应激介导的核转录因子，以Keap1-Nrf2-ARE信号通路介导II相解毒酶和抗氧化基因的转录，被认为是细胞抗氧化机制中最重要的通路。Nrf2与其下游多种保护性基因的激活表达，可诱导一系列解毒酶、生物转化酶、外源物质排外转运体的表达，增加机体的抗氧化能力。研究表明，Nrf2的激活在对抗肝脏氧化应激损伤中具有重要作用。Robert H.等研究发现DMF和MMF均可通过激活细胞内的Nrf2信号途径，增强对细胞的保护作用，使其更好的耐受氧化应激。

DMF，是一种NF-Kappa B的激活抑制剂，可发挥免疫调节和神经保护作用，临床上主要用于治疗多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)。临床研究表明DMF可通过激活Nrf2通路发挥减轻细胞炎症及氧化应激反应能力的作用。DMF经口服后，可迅速被体内酯酶水解为最具生物活性的代谢物——MMF，随后MMF在小肠被安全吸收。在DMF口服5-6小时，MMF血浆浓度达峰值；DMF半衰期为12分钟，而MMF的半衰期为36小时，MMF生物学效应可持续更长时间。

虽然DMF、MMF具有激活Nrf2通路发挥减轻细胞炎症及氧化应激反应能力的作用，且Nrf2在对抗肝脏氧化应激中具有重要意义，但DMF和MMF在治疗与氧化应激损伤相关的肝脏疾病中是否存在作用尚未报道，且目前世界上尚未见有人进行深入研究。

发明内容

本发明对富马酸二甲酯(dimethyl fumarate,DMF)和富马酸单甲酯(monomethyl fumarate,MMF)在肝细胞中对Nrf2信号途径的影响，及其对与氧化应激损伤相关的肝脏疾病的治疗情况进行深入研究。研究表明：包括DMF、MMF在内的富马酸酯可用于制备治疗多种肝病(包括脂肪性肝病、药物性肝病、胆汁淤积性肝病、病毒性肝炎、肝硬化、肝癌等)的药物。研究人员经过大量的科学研究证实了该两种药物均能够激活多种人肝癌细胞及小鼠肝细胞内的Nrf2信号途径，不仅如此，还可防治小鼠肝病模型中氧化应激对肝脏的损伤，有良好的护肝作用。其中，上述的人肝癌细胞为HepG2细胞、Huh7细胞，小鼠肝细胞为AML-12细胞。

优选地，所述药物的剂型为粉剂。所述药物的给药途径包括局部外用，静脉和腹腔注射等。

总之，本发明经过大量的实验研究发现DMF和MMF均能激活多种人肝癌细胞及小鼠肝细胞内的Nrf2信号途径，还可防治小鼠肝病模型中氧化应激对肝脏的损伤，有良好的护肝作用，说明DMF和MMF可用于制备治疗肝病的药物。因此，本发明在用于多种肝脏疾病(包括脂肪性肝病、药物性肝病、胆汁淤积性肝病、病毒性肝炎、肝硬化、肝癌等)的治疗方面具有重要的开发应用前景。

附图说明

图1：DMF对人肝癌HepG2细胞内Nrf2及其抗氧化靶基因表达的影响(10uM DMF处理HepG2细胞WB/PCR)；

图2：DMF对人肝癌Huh7细胞内Nrf2及其抗氧化靶基因表达的影响(DMF处理Huh7细胞WB/PCR)；

图3：DMF对小鼠肝细胞AML-12细胞内Nrf2及其抗氧化靶基因表达的影响(10uM DMF处理AML-12细胞WB/PCR)；

图4：MMF对人肝癌HepG2细胞内Nrf2及其抗氧化靶基因表达的影响(10uM MMF处理HepG2细胞WB/PCR)；

图5：MMF对人肝癌Huh7细胞内Nrf2及其抗氧化靶基因表达的影响(10uM MMF处理Huh7细胞WB/PCR)；

图6：MMF对小鼠肝细胞AML-12细胞内Nrf2及其抗氧化靶基因表达的影响(10uM MMF处理AML-12细胞WB/PCR)；

图7：空白对照组的正常肝组织在光镜下的表现(左图放大100倍，右图放大200倍)；