[发明专利]利用细胞表面分子标志物鉴定人类原态多能性的方法

权利要求书

1.一种获得鉴定人类态多能性的细胞表面分子标志物的方法，通过该方法所获得的标志物来鉴定人类原态多能性；其特征在于：该方法包括下述步骤：

A.建立可诱导的2代重编程系统，利用特定的诱导培养体系从人的成纤维细胞中分别建立态及primed态iPSC系；

B.分别提取所建立的态及primed态iPSCs中的细胞膜蛋白，通过iTRAQ标记及蛋白质谱定量技术，对两者的膜蛋白进行系统比较分析，筛选出相比于primed iPSCs，iPSCs中高表达的膜蛋白库，库中膜蛋白在iPSCs中的表达量为primed iPSCs中表达量的1.5倍；

C、在及primed重编程过程中分别选取特定时间节点进行细胞收样，结合RNAseq分析，获得及primed重编程过程转录组的动态变化，并将在重编程过程中特异性上调的基因与步骤B中筛选出的膜蛋白库进行综合比较；

根据分析，所获得的态细胞表面分子标志物须具备以下两个指标：

1)在iPSC而非primed iPSC或人成纤维细胞的细胞膜表面高表达；

2)相比于primed重编程过程，其在态重编程过程中该蛋白对应的基因表达水平逐渐升高，并在终态iPSC中具有较高的RNA表达水平。