[发明专利]用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备及检测方法

权利要求书

1.一种用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、将侧链修饰有碱基的共轭寡聚物溶于有机溶剂中，得到溶液A；将染料标记的寡核苷酸序列溶于超纯水中，得到溶液B；

步骤二、将溶液A快速注入溶液B，混合均匀，用过滤膜过滤即得到含有荧光复合纳米粒子的溶液C；

步骤一中，所述侧链修饰有碱基的共轭寡聚物选自具有式(1)-(4)的荧光共轭寡聚物中的一种或多种：

2.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述有机溶剂为四氢呋喃、甲醇、丙酮、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺的一种或多种。

3.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤一中，用于标记所述寡核苷酸序列的染料为Rhodamine B,Texas Red，X-rhodamine,Naphthofluorescein,Cy3，Cy3.5，Cy5中的一种。

4.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述染料标记的寡核苷酸序列碱基数目为5-10个。

5.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述溶液A的浓度为1-2×10^-3M；所述溶液B的浓度为1-2×10^-8 M。

6.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述溶液A与溶液B体积比为1：100-1：1000。

7.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述过滤膜为聚偏二氟乙烯过滤膜、聚四氟乙烯过滤膜、聚醚砜过滤膜或尼龙过滤膜中的一种或多种。

8.如权利要求1所述的用于DNA检测的荧光复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤二中得到的荧光复合纳米粒子的粒径为60—120nm。

9.一种利用如权利要求1-8任一项所述荧光复合纳米粒子进行DNA检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将待检测DNA分别加入到所述溶液C中，保持5—30分钟；

(2)采用荧光光谱仪测试DNA加入前后溶液C的荧光强度，荧光共振能量转移效率高的待测样为碱基数目少的DNA，荧光共振能量转移效率低的待测样为碱基数目多的DNA。

10.如权利要求9所述的DNA检测的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述待测DNA为不同碱基数目的单链DNA、双链DNA、扩增前后的DNA或酶切前后的DNA。

11.如权利要求9所述的DNA检测的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述待测DNA的浓度为1×10^-6 M—2×10^-5 M。

12.如权利要求9所述的DNA检测的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述待测DNA的溶液体积为1—20μL。