[发明专利]一种产自黑曲霉的碱性脂肪酶及其生产方法

权利要求书

1.一种碱性脂肪酶的生产方法，其特征在于，步骤如下：

(1)种子培养

摇瓶种子培养：32℃培养48h，摇床转速220r/min；

种子罐扩大培养：按接种量1％将摇瓶种子液接入种子罐，罐压0.05-0.08MPa，培养温度32℃，通风量30m³/h，搅拌转速180r/min，72h，pH控制7.5；

(2)液态发酵

发酵罐发酵工艺条件：接种量7-10％，罐压0.05-0.08Mpa，培养温度32℃，搅拌转速300r/min，pH控制7.5；通风量：0-40h为1:0.5；40-58h为1：1.3；58h-出料为1：1.1，通风量单位为V/V:min；

(3)补料

当pH升至7.8时，开始补料，控制pH在7.8-8.0；

(4)出料

培养至85-95h，酶活增长缓慢，菌体开始部分自溶，即可放罐；

所述碱性脂肪酶产自黑曲霉(Aspergillus niger)，保藏编号CICC 41362。

2.如权利要求1所述的碱性脂肪酶的生产方法，其特征在于，

种子培养基组成以g/L计：葡萄糖20，蛋白胨25，(NH₄)₂SO₄ 5，K₂HPO₄ 1，MgSO₄·7H₂O0.5，橄榄油1.0，pH 7.5；121℃-124℃，0.11-0.12MPa条件下，灭菌35min；

发酵罐培养基组成以g/L计：蔗糖12，鱼粉蛋白胨12，橄榄油乳状液15，硫酸镁0.6，磷酸氢二钾3.0，pH 7.5；121℃-124℃，0.11-0.12MPa条件下，灭菌35min；

补料培养基质组成以g/L计：淀粉20，橄榄油乳状液30，氯化钙0.5，pH 7.5；

补料培养基的液化水解：培养基中加入3％高温淀粉酶升温至90℃，保温30min；

补料培养基液化水解后灭菌工艺条件：121℃-124℃，0.11-0.12MPa条件下，灭菌30min。