[发明专利]一种吉富罗非鱼抗无乳链球菌病优良品系的选育方法

说明书

本发明公开了一种吉富罗非鱼抗无乳链球菌病优良品系的选育方法。通过对不同地理种群的吉富罗非鱼进行人工感染无乳链球菌评估各群体的抗病性能，从中筛选出抗病力较强的地理种群组建抗无乳链球菌病选育基础群；以抗无乳链球菌病性能为主选性状，生长速度为辅选性状，采用动物模型最佳线性无偏差估计(BLUP)法开展家系间和家系内选择，按各家系综合育种值的大小及遗传背景进行留种，经过多个世代选育评估，选育出抗无乳链球菌病能力强、生长又快的吉富罗非鱼优良品系。

技术领域

本发明属于鱼类育种技术领域，具体是一种吉富罗非鱼抗无乳链球菌病优良品系的选育方法。

背景技术

罗非鱼是联合国粮农组织(FAO)推广养殖的国际性养殖鱼类和贸易水产品，在国内外具有广阔的消费市场。罗非鱼养殖业是我国水产的支柱产业，也是我国水产养殖的主导养殖品种。近十年来,随着罗非鱼养殖规模化、集约化的快速发展,病害也日趋严重,其中以无乳链球菌引起的罗非鱼链球菌病最为棘手。该病不仅死亡率高，且死亡速度和传播速度极快，治疗起来极其困难。2009～2016年，我国广东、海南、广西、云南及福建等罗非鱼主产地区连年爆发链球菌病，其中2015年为历年之最，超过60％的养殖面积发病，发病死亡率高达30～80％。该病已成为罗非鱼养殖过程中的“恶魔”，严重阻碍了罗非鱼产业的可持续健康发展，至今尚未找到有效的治疗良策。因此，针对罗非鱼无乳链球菌病，开展抗病品种选育研究，从种源上提高机体的抗病力，可能是解决此病害问题的关键。

目前我国罗非鱼养殖品种主要以吉富罗非鱼和奥尼罗非鱼为主。其中吉富罗非鱼具有生长快、繁殖力强、产量高、易捕捞等优点，特别是其生长速度比奥尼罗非鱼快30～50％,所以其养殖面积占全国总养殖面积的70％以上，是目前我国罗非鱼养殖的主导品种。吉富罗非鱼的引进及大面积推广养殖对我国罗非鱼产业的快速发展起到了非常重要的推动作用。但吉富罗非鱼普遍存在着抗病、抗逆、耐寒能力差等缺点。而奥尼罗非鱼是尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼远缘杂交的品种，在抗病、耐寒及耐盐等方面均优于吉富罗非鱼，但其缺点是产苗量低、生长速度慢。因此，开展罗非鱼抗病品种选育首选还是吉富罗非鱼，在提高机体抗病能力能力的同时，又可以充分利用其生长优势，这对保障罗非鱼产业的持续健康发展具有重要的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种吉富罗非鱼抗无乳链球菌病优良品系的选育方法。

一种吉富罗非鱼抗无乳链球菌病优良品系的选育方法。操作步骤如下：

1.不同地理种群的吉富罗非鱼抗无乳链球菌病性能评估

对“佳吉”、“百桂”和“青岛”三个地理种群吉富罗非鱼开展人工感染无乳链球菌实验。每个种群随机取体重为60～80g 300尾鱼，每个种群设置3个平行，经过5～7天暂养，然后进行人工腹腔注射感染菌株为HN016的无乳链球菌,菌液的浓度约为1.70×10⁷cfu/mL,注射剂量为0.3mL/尾,注射感染后将实验鱼养殖在水温为30～31℃的大桶中，每隔3h记录一次各桶的发病及死亡鱼数量，根据死亡率及死亡鱼的累计存活时间评估各种群的抗病力。最终确定“佳吉”种群抗无乳链球菌病性能显著优于“百桂”和“青岛”种群，因此将以“佳吉”吉富罗非鱼作为基础群进行选育。

2.吉富罗非鱼抗无乳链球菌病家系的建立

确定以“佳吉”吉富罗非鱼作为选育基础群后，首先对亲鱼进行挑选，其标准为：遗传背景清晰、生长速度快、体型较高、体色鲜艳、条纹整齐、生殖孔发育正常，挑选出雌、雄各100尾作为构建家系的亲本，并对它们注入电子标签进行区分。在2m×1.5m×2m规格的网箱中进行家系配对，配对的原则为雌雄1:1，待产苗后将亲本捞出。在网箱中对鱼苗进行培育，待鱼苗生长至60～80g时，运回实验室进行抗无乳链球菌病性能评估，同时在同塘中进行生长性能的测定。

3.吉富罗非鱼家系抗无乳链球菌病性能及生长性能的评估

(1)抗无乳链球菌病性能评估