[发明专利]一种用于检测Her2基因的核酸组合、试剂盒及应用

权利要求书

1.一种非疾病诊断为目的的检测HER2基因的方法，其特征在于，使用核酸组合对待检测的样本进行数字PCR检测，

所述核酸组合包括两对Her2基因引物和两对内参引物，

其中，Her2基因引物序列：

Her2-1-F：5’-ACAACCAAGTGAGGCAGGTC-3’，

Her2-1-R：5’-GTATTGTTCAGCGGGTCTCC-3’；

Her2-2-F：5’-TCTTCCTCTCCCTACATCGG-3’，

Her2-2-R：5’-GTCCAAGTGAACCAGGGAA-3’，

内参引物序列：

RPPH1-F：5’-GTCAGACTGGGCAGGAGATG-3’，

RPPH1-R：5’-TGGCCGTGAGTCTGTTCC-3’；

CEP17-F：5’-CGCTCCTGCACTGTAACACGT-3’，

CEP17-R：5’-TCATTCCTGCAGCCCTTGA-3’，

所述的核酸组合，还包括对应的探针，两对Her2基因引物对应的探针为：

Her2-1-P：5’-R1-GGACATCCTTTGGCTTTTGA-Q1-3’，

Her2-2-P：5’-R2-ACAGCCATGCCCACAGCCAG-Q2-3’，

两对内参引物对应的探针为：

RPPH1-P：5’-R3-TGCCTCCTTTGCCGGAGCTT-Q3-3’，

CEP17-P：5’-R4-AGCAGGTCCAGCCCA-Q4-3’，

其中，R1、R2、R3、R4为荧光报告基团，Q1、Q2、Q3、Q4为荧光淬灭基团，并且R1、R2和R3、R4之间选择不同颜色的荧光报告基团，

荧光报告基团选自FAM、HEX、Cy5、Cy3或VIC；荧光淬灭基团选自TAMARA、BHQ1、BHQ2或MGB，

各条引物的用量分别为300-950nM，各探针的用量分别为100-300nM，

所述数字PCR的扩增条件为：95℃预变性10min；95℃变性15s，60℃退火延伸1min，共进行40个循环。