[发明专利]用于调控靶基因表达的重组DNA构建体和方法有效

申请号：	201611067956.9	申请日：	2009-07-01
公开（公告）号：	CN106995819B	公开（公告）日：	2020-10-20
发明（设计）人：	S·I·埃瓦舒塔;B·E·威金斯;张远记	申请（专利权）人：	孟山都技术公司
主分类号：	C12N15/82	分类号：	C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20;A01H6/46;A01H6/60;A01H6/54
代理公司：	北京市金杜律师事务所 11256	代理人：	陈文平;谢燕军
地址：	美国密***	国省代码：	暂无信息
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摘要：
搜索关键词：	用于调控基因表达重组 dna 构建方法
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【权利要求书】：

1.增加作物植物的产量的方法，包括在作物植物中表达编码RNA分子的重组DNA构建体，所述RNA分子抑制赤霉酸20氧化酶(GA20ox)靶基因的表达，其中所述GA20ox靶基因由SEQ ID NO:2013的序列组成。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述RNA分子包含至少一个选自下组的RNA：(a)加工成用于抑制GA20ox靶基因表达的miRNA的miRNA前体、(b)加工成用于抑制GA20ox靶基因表达的至少一个siRNA的双链RNA、(c)加工成用于抑制GA20ox靶基因表达的至少一个siRNA的ta-siRNA和(d)加工成用于抑制GA20ox靶基因表达的至少一个定相小RNA的定相小RNA定相小RNA转录物。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述作物植物选自下组：玉米、大豆、油菜、棉花、苜蓿、甘蔗、甜菜、高粱和水稻。

4.如权利要求2所述的方法，其中所述miRNA前体的序列如SEQ ID NO:2012所示。

5.可在植物细胞中转录的重组DNA构建体，包含在植物细胞中具有功能且和至少一个多核苷酸操作性连接的启动子，所述多核苷酸选自下组：(a)编码加工成用于抑制GA20ox靶基因表达的miRNA的miRNA前体的DNA、(b)编码加工成用于抑制GA20ox靶基因表达的至少一个siRNA的双链RNA的DNA、(c)编码加工成用于抑制GA20ox靶基因表达的至少一个siRNA的ta-siRNA的DNA和(d)编码加工成用于抑制GA20ox靶基因表达的至少一个定相小RNA的定相小RNA定相小RNA转录物的DNA，其中所述GA20ox靶基因由SEQ ID NO:2013的序列组成。

6.如权利要求5所述的重组DNA构建体，其中所述重组DNA构建体稳定整合入植物细胞的质体或染色体中。

7.如权利要求5所述的重组DNA构建体，其中所述植物细胞是选自下组的作物植物的细胞：玉米、大豆、油菜、棉花、苜蓿、甘蔗、甜菜、高粱和水稻。

8.如权利要求5所述的重组DNA构建体，进一步包含至少一个选自下组的元件：

a.在真核细胞中具有功能的启动子；

b.与经历加工成包含单链RNA的RNA的DNA操作性连接的Pol III启动子；

c.加工成RNA适配子的DNA；

d.转基因转录单元；

e.编码可剪接内含子的DNA；

f.编码自剪接核酶的DNA；

g.编码位点特异性重组酶识别位点的DNA；

h.编码基因抑制元件的DNA；和

i.编码转录调控元件的DNA。