[发明专利]对亚硫酸氢根和次氯酸根双响应比率型荧光标记试剂及其合成方法和应用

权利要求书

1.一种对亚硫酸氢根和次氯酸根双响应比率型荧光标记试剂，其特征在于：以菲并咪唑为荧光基团，以活化的C＝C双键为反应活性基团，其化学名称是：2-(4-(1-甲基-1H菲并[9,10d]咪唑-2基)-苯亚甲基)丙二腈，其化学结构式是：

2.一种权利要求1所述的对亚硫酸氢根和次氯酸根双响应比率型荧光标记试剂的合成方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将菲醌、对二苯甲醛加入到烧瓶中，再加入乙酸铵和乙酸，加热回流进行反应，反应结束，待溶液冷却到室温，抽滤，用乙酸洗涤得到的固体，抽滤得到的滤液加入到冰水中，搅拌得到黄色固体，将黄色固体与乙酸洗涤后的固体合并，得到中间产物4-菲并咪唑苯甲醛；

(2)将步骤(1)得到的中间产物4-菲并咪唑苯甲醛用无水乙腈溶解，加入碳酸钾和氢氧化钾加热回流，降至室温后，加入碘甲烷的无水乙腈溶液，升温回流反应，冷却，过滤，将滤液收集后经旋转蒸馏、纯化得到中间产物4-甲基-菲并咪唑基苯甲醛；

(3)将得到的中间产物4-甲基-菲并咪唑基苯甲醛溶于无水吡啶中，升温并搅拌，加入丙二腈反应，反应完成后，冷却，过滤，得到红色结晶物，即目标产物2-(4-(1-甲基-1H菲并[9,10d]咪唑-2基-苯亚甲基)丙二腈。

3.根据权利要求2所述的对亚硫酸氢根和次氯酸根双响应比率型荧光标记试剂的合成方法，其特征在于：步骤(1)中，菲醌、对二苯甲醛、乙酸铵、乙酸的摩尔比是1:3:7:10。

4.根据权利要求2所述的对亚硫酸氢根和次氯酸根双响应比率型荧光标记试剂的合成方法，其特征在于：步骤(1)中，回流反应的时间为50分钟。

5.根据权利要求2所述的对亚硫酸氢根和次氯酸根双响应比率型荧光标记试剂的合成方法，其特征在于：步骤(2)中，碳酸钾、氢氧化钾、碘甲烷与中间产物4-菲并咪唑苯甲醛的摩尔比为1:1:1.2:1。

6.根据权利要求2所述的对亚硫酸氢根和次氯酸根双响应比率型荧光标记试剂的合成方法，其特征在于：步骤(2)中，加入碳酸钾和氢氧化钾加热回流30分钟，降至室温后，加入碘甲烷的无水乙腈溶液，升温回流反应30分钟。

7.根据权利要求2所述的对亚硫酸氢根和次氯酸根双响应比率型荧光标记试剂的合成方法，其特征在于：步骤(3)中，丙二腈与中间产物4-甲基-菲并咪唑基苯甲醛的摩尔比为1.5:1。

8.根据权利要求2所述的对亚硫酸氢根和次氯酸根双响应比率型荧光标记试剂的合成方法，其特征在于：步骤(3)中，升温至70℃并搅拌10分钟，加入丙二腈反应1小时。