[发明专利]小酸浆的分子特异性标记引物和检测方法有效
申请号: | 201611071090.9 | 申请日: | 2016-11-29 |
公开(公告)号: | CN106636369B | 公开(公告)日: | 2020-05-19 |
发明(设计)人: | 冯尚国;王慧中;焦凯丽;姜梦莹;卢江杰;沈晨佳 | 申请(专利权)人: | 杭州师范大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙) 33240 | 代理人: | 杜军 |
地址: | 310036 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小酸浆 分子 特异性 标记 引物 检测 方法 | ||
1.小酸浆的分子特异性标记引物,其特征在于该特异性标记引物序列如下:
上游引物XSJF: 5’- TTGCAAACTATCTTGTGAGTCG-3’;
下游引物XSJR: 5’- CCACCAGAATGTACTTGTTACG-3’。
2.一种利用权利要求1所述的分子特异性标记引物对小酸浆进行快速检测的方法,其特征在于所述方法为:以所述分子特异性标记引物作为扩增引物,以待测酸浆属植物样品基因组DNA为模板,进行PCR扩增,电泳检测,若电泳结果出现444 bp大小的特异性片段,则待测样品为小酸浆,反之则不是;
所述分子特异性标记引物序列为:
上游引物XSJF: 5’- TTGCAAACTATCTTGTGAGTCG-3’;
下游引物XSJR: 5’- CCACCAGAATGTACTTGTTACG-3’。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述的PCR扩增体系包括含Mg2+ 10×Buffer 2μL,10mM dNTPs 0.8μL,10μM引物XSJF 1μL,10μM引物XSJR 1μL,2U/μL Taq酶 0.5μL,50ng/μL模板DNA 1μL,ddH2O 13.7μL,共计20μL。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述的PCR反应程序设置为: 94℃预变性5min;94℃变性50 s,60℃退火50 s,72℃延伸1.5 min, 共35个循环;72℃延伸10 min。
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