[发明专利]乳酸乳球菌乳亚种YF11的非编码小RNA s087

说明书

本发明公开了一种乳酸乳球菌乳亚种YF11的非编码小RNA s087，乳酸乳球菌YF11的非编码小RNA s087，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示；或与序列表SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列具有90％以上同源性并与耐酸相关的核苷酸序列。实验结果表明：乳酸乳球菌乳亚种YF11的非编码小RNA s087过表达后，含有s087过表达的乳酸乳球菌在酸性环境下的生存能力明显增强，提高在酸性发酵液的存活率，增加nisin的稳定性，从而提高nisin产量。

技术领域

本发明涉及细菌非编码小RNA(small non-coding RNA,sRNA),特别是涉及一个乳酸乳球菌乳亚种YF11的非编码小RNA s087、含有乳酸乳球菌乳亚种YF11的非编码小RNAs087的载体、含该载体的重组乳酸乳球菌及应用。

背景技术

细菌非编码小RNA(small non-coding RNA,sRNA)是近年来在细菌等原核生物中发现的一类RNA调控因子，他们不编码蛋白，通常位于基因间区，长度在50～500个核苷酸之间，是在生物体整个生命过程中十分关键的基因调节因子。细菌sRNA是细菌代谢、毒力和适应环境压力的重要调节因子，在应对环境变化的基因表达调控中发挥重要作用。sRNA主要通过与靶标基因的mRNA相互作用发挥调控功能。迄今为止，大部分细菌sRNA的研究集中在大肠杆菌等模式生物，但随着研究的深入，已有越来越多的研究转向致病菌，如霍乱弧菌、产单核细胞李斯特菌、铜绿假单胞菌、结核杆菌、沙门氏菌、肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌等，在这些病原体中，已经证实sRNA能够在转录后水平调控基因表达，并在压力应答和毒力调控中发挥重要作用。挖掘乳酸乳球菌的sRNA，对sRNA在环境压力下的调控机制进行分析，可更好地提高菌株某方面的耐受力或增加产物产量。sRNA几乎不会增加菌株的代谢负担，而且不会影响正常的生长和生产过程，同时可以有效地调节菌株基因的表达，进而提高菌株的耐受性，在构建工程菌株方面具有重要的意义。

Nisin(乳链菌肽)是由一些乳酸乳球菌在代谢过程中合成和分泌的具有较强抑菌作用的分子小肽，对于大多数革兰氏阳性菌具有抑菌效果，与化学合成防腐剂相比更是具有高效、安全、无毒、无副作用的优点。Nisin生产的困境在于乳酸乳球菌在发酵过程中，菌体生长的最适环境与nisin稳定的pH之间存在矛盾。乳酸乳球菌在pH中性环境下生长势头良好，但随着发酵时间的延长，自身代谢的乳酸使发酵液的pH持续降低，抑制菌体的生长，而且乳酸大量积累本身还会抑制nisin的合成；而nisin则在pH2.0条件下非常稳定，随着pH值的升高，稳定性越差，活性越低。故通过筛选出耐酸相关sRNA构建耐酸菌株使其在低pH下正常生长生产具有很好的工业价值和研究意义。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种乳酸乳球菌乳亚种YF11的非编码小RNA s087。

本发明的第二个目的是提供一种含有乳酸乳球菌乳亚种YF11的非编码小RNAs087的载体。

本发明的第三个目的是提供一种含有上述载体的重组乳酸乳球菌。

本发明的第四个目的是提供一种含有上述载体的重组乳酸乳球菌在发酵生产乳链菌肽的应用。

本发明的技术方案概述如下：

乳酸乳球菌乳亚种YF11的非编码小RNA s087，其核苷酸序列如序列表中SEQ IDNO.1所示；或与序列表SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列具有90％以上同源性并与耐酸相关的核苷酸序列。

含有乳酸乳球菌乳亚种YF11的非编码小RNA s087的载体,其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.2所示。

含有上述载体的重组乳酸乳球菌。

上述重组乳酸乳球菌在发酵生产乳链菌肽的应用。

本发明优点：