[发明专利]一种快速脱除马铃薯病毒的方法有效
申请号: | 201611082353.6 | 申请日: | 2016-11-30 |
公开(公告)号: | CN106718887B | 公开(公告)日: | 2018-12-14 |
发明(设计)人: | 董家红;张丽珍;吴阔;赵立华;陈永对;苏晓霞;郑宽瑜;张仲凯 | 申请(专利权)人: | 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01C1/08;A01G7/06;A01N43/54;A01N43/38;A01N43/16;A01P1/00;A01P21/00 |
代理公司: | 昆明知道专利事务所(特殊普通合伙企业) 53116 | 代理人: | 姜开侠;姜开远 |
地址: | 650223*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 脱除 马铃薯 病毒 方法 | ||
1.一种快速脱除马铃薯病毒的方法,其特征在于包括预处理、脱毒、检测步骤,具体包括:
A、预处理:对含有马铃薯病毒的薯块进行赤霉素催芽处理,到出芽后,消毒备用;
B、脱毒:剥茎尖0.1~0.7mm,置于MS培养基上,于温度20~30℃,光照度2000~3000Lx下培养7~28天至茎尖长至4~6mm,喷施抑制病毒的植物抗性诱导剂,再于温度20~30℃,光照度2000~3000Lx下培养3~5天后,再次剥茎尖0.1~0.7mm,置于MS培养基上,于温度20~30℃,光照度2000~3000Lx下培养7~28天至茎尖长至4~6mm,喷施抑制病毒的植物抗性诱导剂,再于温度20~30℃,光照度2000~3000Lx下培养3~5天后,再次剥茎尖0.1~0.7mm,置于MS培养基上;每次留下5~6个茎尖继续培养,用作检测;所述剥茎尖是把处理待用的马铃薯小苗茎尖剪下放在解剖镜下剥离,直到显现出圆滑生长点时,用一次性注射用针管切取0.1~0.7mm、带1~2个叶原基的茎尖;所述植物抗性诱导剂为氨基寡糖素、宁南霉素或3-羟基-3-丙酮基羟吲哚;
C、检测:将脱毒处理后长出的组培苗用电子显微镜负染色、ELISA、qRT~PCR检测,80%以上的苗不能检测到病毒。
2.根据权利要求1所述的快速脱除马铃薯病毒的方法,其特征在于A步骤中所述的消毒为升 汞消毒。
3.根据权利要求1所述的快速脱除马铃薯病毒的方法,其特征在于C步骤所述的检测是将第三次剥茎尖后长出的组培苗用电子显微镜负染色、ELISA、qRT-PCR检测,80%以上的苗不能检测到病毒。
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