[发明专利]一种甲型流感病毒重组蛋白及其单克隆抗体的制备在审
| 申请号： | 201611096411.0 | 申请日： | 2016-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN106632619A | 公开（公告）日： | 2017-05-10 |
| 发明（设计）人： | 胡祥叶;余铭恩;项美华;朱伟;王璐;刘清泉;吴琼杉 | 申请（专利权）人： | 杭州贤至生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/11 | 分类号： | C07K14/11;C12N15/44;C12N15/70;C07K16/10 |
| 代理公司： | 杭州中平专利事务所有限公司33202 | 代理人： | 翟中平,张俊 |
| 地址： | 311100 浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 流感病毒 重组 蛋白 及其 单克隆抗体 制备 | ||
【权利要求书】：
1.一种甲型流感病毒重组蛋白，其特征在于该重组蛋白质的氨基酸序列如序列表SEQ ID No:1所示的氨基酸序列。
2.一种甲型流感病毒重组蛋白，其特征在于该重组蛋白质的氨基酸序列包含如序列表SEQ ID No:2和SEQ ID No:3所示氨基酸序列。
3.一种核苷酸序列，其特征在于该核苷酸序列如序列表SEQ ID No:4所示，可编码权利1-2所述的甲型流感病毒重组蛋白。
4.一种质粒载体，其特征在于该质粒载体含有权利要求3所述的核苷酸序列。
5.一种菌株，其特征在于该菌株包含采用权利要求4所述的质粒载体。
6.权利要求1-2所述的甲型流感病毒重组蛋白在用于甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体的制备，包括:
(a)合成权利要求3所述的核苷酸序列，并连接质粒载体，构建甲型流感病毒重组蛋白表达载体；
(b)将步骤(a)中的甲型流感病毒重组蛋白表达载体转化到大肠杆菌，筛选得到甲型流感病毒重组蛋白表达菌株；
(c)大规模培养甲型流感病毒重组蛋白表达菌株后，经纯化获取甲型流感病毒重组蛋白；
(d)甲型流感病毒重组蛋白多次免疫Balb/c小鼠后，取其脾脏细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合，经过多轮筛选得到单克隆细胞株；
(e)纯化单克隆抗体并分别标记胶体金颗粒，通过正交实验确定最佳单抗配对组合。
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