[发明专利]一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法

权利要求书

1.一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法，其特征在于：包括胚、芽预处理、丛生芽诱导培养、不定根诱导培养以及移栽培植；所述组织培养方法的具体步骤为：

(1)预处理：将中草药千里香的种子、顶芽或腋芽，经过无菌处理后接种在盛放有萌发培养基的试管或培养瓶中进行萌发培养，每试管或培养瓶中接种一颗种子或顶芽或腋芽，然后置于培养室中；

(2)丛生芽诱导培养：将在萌发培养基中培养得到的萌发小苗转入丛生芽诱导培养基中进行诱导培养，5-6周后进行扩培继代培养，得到无根苗；

(3)不定根诱导培养：将无根苗转入不定根诱导培养基，培养5-7周；

(4)移栽培植：将不定根诱导培养得到的根长为0.4-1.5cm的种苗经炼苗后移栽至泥炭+细沙或珍珠岩混合基质中，在温度16-25℃，湿度60-70％，自然光照的条件下培养3-5周，待植株发育3-5片功能叶后，将其植入室外大田种植即可；

在步骤(1),当接种顶芽或腋芽时，所述萌发培养基为：MS基础培养基+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼 脂粉5.4g/L，pH 5.8-7.0；或当接种种子时，所述萌发培养基为MS基础培养基+6-BA 2.0mg/L+GA 30mg/L+ 蔗糖20g/L+琼脂粉5.4g/L，pH 5.8-7.0；

在步骤(2)，所述丛生芽诱导培养基为：MS基础培养基+6-BA 1.0-2.5mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L+TDZ 0.1-4mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.4g/L，pH 5.8-7.0；

在步骤(3)，所述不定根诱导培养基为：1/2MS基础培养基+6-BA1.0-2.5mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L+IBAK 0.1-0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.4g/L，pH 5.8-7.0。

2.根据权利要求1所述的一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法，其特征在于：在步骤(1)，所述无菌处理为：用软毛刷醮加入了少量洗洁精的水液轻擦枝条及其腋芽处，用自来水冲洗1-1.5h，在超净工作台中，用体积分数浓度为65-75％的酒精灭菌20-40s，再用无菌水冲洗3-4次，再经质量分数浓度为0.1-0.2％的升汞灭菌8-10min，无菌水冲洗3-5次。

3.根据权利要求1或2所述的一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法，其 特征在于：所述萌发培养的条件为温度23-27℃，光照时间12-14h/d，光照强度1500- 20001ux；丛生芽诱导培养的条件为温度23-27℃，光照时间14-16h/d，光照强度1500- 20001ux；不定根诱导培养条件为温度23-27℃，光照时间10-12h/d，光照强度2000- 25001ux。

4.根据权利要求3所述的一种适用于中草药千里香种苗的组织培养方法，其特征在于：在步骤(2)，萌发小苗的苗高为1.0-3.0cm，将其剪成5-10mm长度的带叶茎段后，再转入丛生芽诱导培养基中进行诱导培养。