[发明专利]人员防护装备防护性能评价用细菌标准物质及其制备方法

权利要求书

1.一种人员防护装备微生物防护性能评价用细菌标准物质，其特征在于，由两个组分组成：

1)含粘质沙雷氏菌的菌体和菌体保护剂的冻干物；

2)用于菌体冻干物复水的稳定剂水溶液；

制成所述菌体保护剂的原料的重量百分比为：5～7％的葡萄糖、1～2％的明胶、2～3％的卵黄；冻干保护剂用磷酸盐缓冲液溶解；

所述稳定剂水溶液中各成分的质量体积百分比：0.1～1.0％的氯化钠、0.1～1.0％的牛血清白蛋白和0.2～2％的抗坏血酸，其余是水；

所述标准物质的制备方法，其特征是，用生理盐水将粘质沙雷氏菌菌体稀释至10¹⁰级，制成新鲜菌匀液，再与保护剂按照1:1的体积比混合，于-70℃下预冻4h后冻干，得到所述标准物质。

2.权利要求1所述的标准物质，其特征在于，所述粘质沙雷氏菌用稳定剂水溶液复水后，粘质沙雷氏菌活菌浓度为0.5×10¹⁰～5.0×10¹⁰CFU/mL。

3.权利要求1所述的标准物质，所述冻干物为饼状或球状。

4.权利要求1所述的标准物质，其中所述的制备方法，所用的粘质沙雷氏菌的培养方法是：挑取单菌落于已高压灭菌的营养肉汤中，30℃±1℃下，180×g摇床培养12h。

5.权利要求1所述的标准物质，制备得到的标准物质于-20℃下保存。

6.权利要求1所述标准物质的定值方法，具体操作如下：

用2mL稳定剂水溶液对标准物质进行复水溶解，充分混匀后制备成S₀样品匀液；

再用无菌磷酸盐缓冲液对充分溶解后的样品S₀进行10倍系列稀释；根据给出的粘质沙雷氏菌活菌浓度范围进行估算，选择三个稀释度的样品匀液，每个稀释度分别吸取0.2mL样品匀液涂布于营养琼脂平板，将平板静置10min后，倒置于培养箱，30℃±1℃下培养12～24h；

选择有典型的粘质沙雷氏菌菌落且菌落数在15CFU～150CFU之间的平板，计数典型菌落数和记录稀释因子；菌落计数以菌落形成单位CFU表示，实验结果以活菌浓度表示，计数该稀释度平板上的典型菌落，计算标准值；定值结果表示为：标准值±扩展不确定度；

所述计算标准值按如下公式：

式中，

C为粘质沙雷氏菌活菌浓度，CFU/mL；

N为平板上粘质沙雷氏菌典型菌落的总数，CFU；

d为稀释因子，无量纲；

v为平板上粘质沙雷氏菌匀液的接种体积，mL。