[发明专利]同时测定稻米中多种游离糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及检测领域，特别一种同时测定稻米中多种游离糖的方法。

背景技术

稻米中的游离糖，是指易溶于水的低聚糖，一般有葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和麦芽糖等。通过味觉传感器、感官分析和和化学成分分析表明，稻米中的游离糖含量与米饭的甜味有很强的相关性，其中的葡萄糖和蔗糖是稻米甜味的主要贡献者。即游离糖的组成和含量对稻米的滋味(主要是甜味)具有很大的贡献，在稻米食味品质研究和评价方面具有重要意义，并在将来有望成为评价稻米滋味品质的一个指标。而目前文献中，一般只测定稻米中总的游离糖含量，对各游离糖的组成及各糖组分含量的测定较少。稻米中多种游离糖的同时测定技术有待补充。

目前现有的对食品中各游离糖的组成及含量的测定的方法主要为：样品首先经过除酯、除蛋白处理后用水提取，然后采用液相色谱分离-示差折光检测或蒸发光散射检测法。前处理较为繁琐。液相色谱分离分离过程一般采用乙腈-水作为流动相。乙腈极易挥发，对检测人员及环境危害较大。而离子色谱采用氢氧化钠水溶液作为流动相，无挥发，废液易处理，对操作人员和环境更加友好。糖类本身没有紫外吸收，需要衍生才能适用于紫外检测器。但由于衍生过程操作繁琐，因此紫外可见检测器较少用于糖类的测定。目前，文献中一般采用示差折光检测器或蒸发光散射检测器这两类通用检测器。但存在的问题是检测器灵敏度不高，方法检出限较高的问题。稻米中游离糖含量较低，此类检测器难以满足需求，因此一般需要对提取液进行浓缩处理以达到检测需求。相比于示差折光检测器或蒸发光散射检测器，脉冲安培电化学检测器具有很高的灵敏度。而同时糖类也有电化学活性，可采用脉冲安培检测器检测。离子色谱-脉冲安培检测法测定食品(如蜂蜜、食用菌、蜜枣等)中糖类的方法已有报道。但稻米中游离糖含量低，且基质复杂，富含淀粉及淀粉降解酶，所含的游离糖种类及含量与蜂蜜、食用菌、蜜枣等食品具有很大的差别。因此，这些方法不能适用于稻米中各游离糖的组成及含量测定。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种同时测定稻米中多种游离糖的方法，采用本发明的方法可以同时测定稻米中游离的葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和麦芽糖含量。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种同时测定稻米中多种游离糖的方法，包括以下步骤：

1)、样品制备：

将稻米粉碎(例如经旋风磨粉机磨粉)后，作为待测样品；

2)、样品前处理：

取0.5g待测样品放入至容器(例如为15mL离心管)中，加入10mL体积浓度50％乙醇水溶液，振荡混匀；然后于2500～3500r/min离心10～20min(较佳为3000r/min离心15min)；

以离心所得的沉淀物替代上述待测样品，重复上述加入乙醇水溶液、振荡混匀以及离心；重复过程为1～2次；

将所有离心所得的上清液合并后混合均匀，然后过0.45μm微孔滤膜，得待测样品溶液；

3)、采用离子色谱-脉冲安培法进行分析：

配制游离糖的梯度混合标准工作溶液(即，将各种游离糖配制成不同浓度的梯度混合标准工作溶液)；

将每种梯度的混合标准工作溶液取相同体积注入离子色谱仪进行测定，以游离糖(各种游离糖)的浓度作为横坐标，峰面积作为纵坐标，绘制标准曲线；

取与混合标准工作溶液相同体积的待测样品溶液注入离子色谱仪中进行测定，以保留时间定性，峰面积定量；从而获得待测样品溶液中游离糖的浓度，最终获得待测样品中游离糖的浓度；

所述的离子色谱-脉冲安培法进行分析的参数设置如下：

流动相：60％水+40％250mmol/L NaOH；流速：1mL/min；该％为体积％。

色谱柱：Metrosep Carb 1柱，5.0μm，150mm×4.0mm；

检测器：脉冲安培检测器，金工作电极；Ag/AgCl参比电极；检测电位：E₁＝0.1V，t₁＝0.4s，E₂＝0.7V，t₂＝0.2s，E₃＝-0.1V，t₃＝0.4s，t_sample＝40ms；

所述的离子色谱仪的型号为：万通850Professional IC；

所述的检测器的型号为：万通871Advanced Bioscan。