[发明专利]肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物及其制取方法和用途

权利要求书

1.一种具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物，其特征在于由分子量为150,000Da～400,000Da的多糖与蛋白质组成的缀合物，所述的多糖来自于肺炎链球菌荚膜多糖。

2.根据权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物，其特征在于所述的多糖通过将所述的肺炎链球菌荚膜多糖进行乳化或高压均质方法制取。

3.根据权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物，其特征在于所述的蛋白质为CRM197蛋白。

4.根据权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物，其特征在于所述的多糖的分子量为200,000Da～300,000Da。

5.根据权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物，其特征在于所述肺炎链球菌的荚膜多糖取自于血清型为1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、16F、17F、18C、19A、19F、20、20F、23A、23F和33F之一种或几种的肺炎链球菌。

6.一种制取权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物的方法，其特征在于先采用物理剪切将肺炎链球菌荚膜多糖进行降解，再超滤富集，获得降解的荚膜多糖，再通过激活剂对降解的荚膜多糖进行活化，调整pH值，再将活化的降解的荚膜多糖与CRM197蛋白相混合，于室温，使降解的荚膜多糖与CRM197蛋白相互作用30分钟～60分钟后加入终止剂，反应体系在低温下过夜后，用澄清滤器过滤、超滤膜浓缩透析，从而获得肺炎球菌多糖与蛋白缀合物单价原液。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于激活剂选自于1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟硼酸、溴化氰和高碘酸钠之一种或几种。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述的激活剂用量为多糖总量的50w/w％～100w/w％。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述的多糖与CRM197蛋白相互作用的pH为8.90～9.60。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述的多糖与CRM197蛋白相互作用的温度为室温。

11.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述的多糖与CRM197蛋白相互作用的时间为1分钟～5分钟。

12.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述的低温为2℃～8℃。

13.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述的过夜为16小时～24小时。

14.根据权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物在制备肺炎链球菌结合疫苗中的应用。