[发明专利]一种抗肥胖七肽NPVWKRK

说明书

本发明公开了一种抗肥胖七肽NPVWKRK，该合成多肽的氨基酸序列如下所示：Asn‑Pro‑Val‑Trp‑Lys‑Arg‑Lys，缩写为NPVWKRK，分子量927.12，纯度98.95%。本发明的七肽NPVWKRK使用多肽合成仪，采用固相合成法合成。通过体外小鼠前脂肪细胞3T3‑L1增殖抑制活性检测，在浓度0.125‑2 mg/mL范围内，本发明的多肽对3T3‑L1呈现出了一定的抑制效果。在2 mg/mL时，对3T3‑L1的体外增殖抑制率为45.38%。本发明提供一种具有潜在体外抗肥胖活性的合成多肽，可应用于生物制药领域。

技术领域

本发明属于生物制药领域，具体涉及一种合成多肽及其应用。

背景技术

生物活性肽是对机体的功能或状态具有积极作用并最终影响机体健康的特殊蛋白质片段。相较于蛋白质而言，小分子肽片段的优越性主要体现在：更易被人体吸收利用；活性高，在较小浓度下即可发挥其特有的生理作用；分子量小，易于修饰和改造，能够通过人工化学合成等。而相较于单一的氨基酸而言，小分子肽除了具有特殊的生理活性外，在吸收通道和吸收速度上也具有氨基酸无可比拟的优越性。已有研究证实，人体小肠存在专门的低聚肽吸收通道，人体摄入的蛋白质经过多种消化酶的水解，主要以低肽的形式被吸收。许多研究表明，各种来源的生物活性肽具有抗氧化、抗肿瘤、抑菌、降压、降血糖等多种作用，成为生物医药和保健品开发的热点。肥胖增加动脉粥样硬化，冠心病，高血压，糖尿病，痛风，脂肪肝等疾病的发病危险。因此，对具有减肥降脂作用而安全无害的生物活性肽的开发研究，变得尤为重要。目前，具有减肥降脂作用的多肽包括利拉鲁肽，鲈鱼活性肽，蚕蛹肽等。

发明内容

本发明选取小鼠前脂肪细胞3T3-L1为研究对象，使用MTT法测定合成肽的体外抑制活性。本发明的目的是提供一种具有体外抗肥胖活性的合成多肽，可应用于生物制药领域。

本发明合成的抗肥胖七肽缩写为NPVWKRK，分子量927.12，序列为：Asn-Pro-Val-Trp-Lys-Arg-Lys。其中，

Asn表示英文名称为Asparagine，中文名称为天冬酰胺酸的氨基酸的相应残基;

Pro表示英文名称为Proline，中文名称为脯氨酸的氨基酸的相应残基；

Val表示英文名称为Valine，中文名称为缬氨酸的氨基酸的相应残基;

Trp表示英文名称为Tryptophan ，中文名称为色氨酸的氨基酸的相应残基;

Lys表示英文名称为Lysine，中文名称为赖氨酸的氨基酸的相应残基;

Arg表示英文名称为Arginine，中文名称为精氨酸的氨基酸的相应残基;

Lys表示英文名称为Lysine，中文名称为赖氨酸的氨基酸的相应残基。

本发明所述的氨基酸序列采用标准 Fmoc 方案，通过树脂的筛选，合理的多肽合成方法。将目标多肽的 C-端羧基以共价键形式与一个不溶性的高分子树脂相连，然后以这个氨基酸的氨基作为起点，与另一分子氨基酸的羧基作用形成肽键。不断重复这一过程，即可以得到目标多肽产物。合成反应完成后，去除保护基，将肽链与树脂分离，即得到目标产物。多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序从C端向N 端合成。

本发明将终浓度为0.125-2 mg/mL 的合成多肽与3T3-L1混匀，孵育48 h后，经MTT法检测，对脂肪细胞抑制率达到14.59%-45.38%,可在制备生物医药领域中应用。

所述七肽NPVWKRK在浓度为2 mg/mL 时，对3T3-L1的体外增殖抑制率为45.38%。

与现有技术相比，本发明具有如下优点和技术效果：