[发明专利]一种眼镜蛇神经毒素的毛细管电泳体内检测方法

权利要求书

1.一种眼镜蛇神经毒素的毛细管电泳体内分析方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

(1)取含有FITC-NT的待测血浆样品，进样进行高效毛细管电泳，激光诱导荧光检测器检测，获得待测样品的电泳图谱；所述高效毛细管电泳的条件为：以CEofix^TMMEKC试剂盒为缓冲液，分离电压为20kV，温度为24℃，检测波长为激发波长488nm，发射波长520nm；所述FITC-NT代表荧光单标记的眼镜蛇神经毒素；

(2)建立FITC-NT的标准曲线方程，根据其标准曲线方程以及步骤(1)所得的待测样品的电泳图谱中FITC-NT的峰面积，计算出待测样品中FITC-NT的浓度。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，所述高效毛细管电泳中采用的毛细管柱为有效长度为55cm的非涂层毛细管柱，内径75um。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，所述高效毛细管电泳采用压力进样，6.9kPa，10s。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，进样量20μL。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中，所述高效毛细管电泳开机后用0.1mol·L^-1氢氧化钠溶液冲洗5min，CEofix^TMMEKC试剂盒涂层冲洗5min，每次进样前用CEofix^TMMEKC缓冲液冲洗毛细管柱3min，每针运行20min，每针检测后用CEofix^TMMEKC试剂盒缓冲液冲洗5min，分析结束后用0.1mol·L^-1氢氧化钠溶液和水各冲洗5min。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中，所述FITC-NT的标准曲线方程按以下方法获得：取FITC-NT标准贮备液逐级稀释，配制一系列不同浓度的标准工作溶液，用SD大鼠空白血浆配制成不同FITC-NT浓度的血浆标准添加样品，按照步骤(1)的方法进行检测，获得血浆标准添加样品的电泳图谱，以FITC-NT浓度为横坐标，相应的电泳图谱中的峰面积为纵坐标进行线性回归，绘制标准曲线方程。

7.一种利用FITC-NT进行神经毒素的体内药代动力学参数检测的方法，所述FITC-NT代表荧光单标记的眼镜蛇神经毒素，所述方法包括以下步骤：

(A)对大鼠进行FITC-NT的静脉和/或肌肉注射，注射后在不同时间采血，离心出血浆，血浆样品在-20℃冷冻保存直至测试；

(B)取给药后不同时间的血浆样品，作为待测样品进样进行高效毛细管电泳，激光诱导荧光检测器检测，获得待测样品的电泳图谱；所述高效毛细管电泳的条件为：以CEofix^TMMEKC试剂盒为缓冲液，分离电压为20kV，温度为24℃，检测波长为激发波长488nm，发射波长520nm；

(C)建立FITC-NT的标准曲线方程，根据其标准曲线方程以及步骤(B)所得的待测样品的电泳图谱中FITC-NT的峰面积，计算出待测样品中FITC-NT的浓度；

(D)以时间为横坐标，血浆样品中的FITC-NT浓度为纵坐标，绘制FITC-NT的血药时间曲线，获得体内药代学参数。