[发明专利]分析装置

说明书

本申请是申请号为200880011652.8、申请日为2008年4月9日、发明名称为“分析装置”的中国发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及用于在扩大的浓度范围内测定分析物的存在或程度的分析装置、试剂盒和方法。

发明背景

为了检测流体样品中的分析物，已经开发和商业化了简单的侧流免疫分析装置，参见例如EP291194。这样的装置一般包含多孔的载体，该载体含有能够与目标分析物结合的干燥的、可移动的、标记结合试剂，固定化的结合试剂也能够结合在标记结合试剂下游的检测区中提供的分析物。检测在检测区固定化的、标记的结合，为样品中分析物的存在提供了指示。

或者，当目标分析物是半抗原时，免疫分析装置可以利用竞争性反应，其中标记的分析物或分析物类似物与样品中存在的分析物竞争检测区中固定化的结合试剂。或者，分析装置可以利用抑制反应，其中在检测区提供了固定化的分析物或分析物类似物，分析装置含有针对分析物的可移动的标记结合试剂。

在检测分析物时，夹心免疫分析是通常选择的分析。但是，夹心分析不总是可行的，例如在小分子例如半抗原的情况下，它们不够大，不能在其上同时结合两种不同的结合配偶体。使用利用夹心分析方法的典型侧流装置制备的剂量响应曲线显示出，信号的水平随着分析物的增加而增加，直到较高的分析物水平的点时曲线趋于平稳。在更高的分析物水平时，由于在检测区优选捕获还没有与标记的试剂结合的分析物，信号开始降低。这种现象被称为钩状效应(hook effect)。因此，由于在较高的分析物水平下观察到的信号量或强度可能与在较低分析物水平下观察到的相同或甚至更低，夹心免疫分析表现出了有限的分析范围。

竞争或抑制分析方法一般在零或低水平分析物时提供了高信号。当分析物水平升高时，依赖于存在的标记结合物类的量与分析物的量的比率，信号水平仍然可能是高的。当分析物水平继续增加时，信号开始降低，因为未结合的分析物或者与标记的分析物或分析物类似物竞争固定化的结合试剂，或者与标记结合试剂结合，降低了标记结合试剂在检测区的结合。

因此，使用夹心分析测量扩大范围内的分析物，可能会遇到有关钩状效应的问题。高的分析物浓度开始产生分析信号的降低。竞争或抑制分析在高的分析物浓度下导致分析信号的损耗，从而使分析物可以被测量的范围受到限制。

因此，上述的分析方法不适合于在扩大的分析物范围内测量分析物水平。

US2005/0112780公开了分析装置和用于扩展分析装置的动态检测范围的方法，包括检测区和提供在检测区下游的补偿区的流过性多孔载体。检测涉及第一种结合试剂，该试剂与检测探针结合，产生强度与分析物的量成正比的检测信号，补偿区含有第二种捕获试剂，该试剂与检测探针结合，产生与检测信号的强度成反比的信号。分析可以进一步包含第三个产生信号的校准区。第一种结合试剂可以选自抗原、半抗原或链亲和素。第一种和第二种结合试剂可以从许多物类中选择，包括抗原、半抗原或链亲和素。

US2004/0197820公开了含有检测区的用于减小钩状效应的流过性多孔载体分析装置，其中所述装置可以包含下游的校准区。

US2006/0019404公开了具有扩展的动态范围的分析装置，含有侧流测试条，该测试条含有多个检测区，它们对分析物浓度具有逐渐降低的灵敏度。分析装置可以含有两种各具有多个检测区的载体。检测多个检测区中存在的标记物/信号的量，以确定分析物的浓度。

EP462376公开了含有捕获位点和结合物回收位点的分析装置，其中结合物回收位点接收和结合迁移通过所述捕获位点的所述结合物或结合物复合物，并且其中通过检测位于结合物回收位点和捕获位点的固定化的结合物，来确定目标分析物的量。

本发明人已经表明，对于其中在同一个多孔载体上提供了多个用于检测分析物的检测区的分析装置来说，上游检测区的结合可以改变下游检测区的结合特征，并且上游检测区结合的任何变化可以引起下游检测区结合的联动变化。在较高分析物浓度水平下尤其如此，并可能导致分析的精确性差。此外，已经发现，在测试的运行过程中，检测区中存在的相应结合试剂之间可能发生交叉交合，在装置的制造以及将它们在干燥状态下保存期间，也观察到了交叉结合。这显示出对分析的精确性和灵敏性水平有影响。在现有技术中，这些问题以前似乎还没有被认识到。

本发明的目标是提供改进的分析装置、试剂盒和方法，以扩大所述分析的分析物范围。

发明内容