[发明专利]流式细胞仪

说明书

流式细胞仪，其包括：基于激光二级管的光学子系统，用于将光束入射到通过观察区的粒子上；复合显微镜物镜，用于对由通过观察区的粒子散射的光和发出的荧光进行收集和成像；流体子系统，用于将液体鞘流供应到观察区；蠕动泵，用于将与液体鞘流一起通过观察区的携载粒子的液体试样流注入到液体鞘流内；多模光纤，其接收由复合显微镜物镜收集并成像的从观察区散射和发出的荧光；以及波分多路复用器，用于将经由光纤所接收的光在光学上分离成有色带。

本申请是2013年5月30日提出的第201380039184.6号中国专利申请的分案申请。

技术领域

本公开总地涉及流式细胞术的技术领域，并且更具体地，涉及改进的流式细胞仪连同包括在其中的各个独立的组件的结构和操作。

背景技术

流式细胞术是在细胞计数、分选、生物标志物检测和蛋白质工程中采用的生物物理学技术。在流式细胞术中，悬浮于液流中的细胞通过电子检测设备。流式细胞术允许每秒对高达数千个细胞同时进行物理和/或化学特性的多参数分析。

流式细胞术具有包括在分子生物学、病理学、免疫学、植物生物学和海洋生物学领域中的多项应用。流式细胞术在医学中(尤其是在移植、血液学、肿瘤免疫学和化疗、产前诊断、遗传学和用于性别预选的精子分选中)也具有广泛的应用。在海洋生物学中，光合作用浮游生物的自体荧光特性可被流式细胞术用于表征个体密度和群落组成。在蛋白质工程学中，流式细胞术与酵母展示和细菌展示结合使用，以便识别具有所需性质的在细胞表面展示的蛋白质变异体。流式细胞术的一种常见变型是基于粒子的性质对粒子进行的物理分选，从而纯化所关注的群体。

整个流式细胞仪系统包括下列主要部件。

1.流通池，通常称为鞘流、鞘液体或鞘流体的液流通过流通池，携载细胞或粒子并将细胞或粒子流体动力学地对准，使得细胞或粒子单行通过流通池。

2.测量子系统，其耦连到流通池，检测通过流通池的细胞或粒子，且

通常是下述之一：

a.阻抗或电导率测量子系统；或

b.光学照射子系统连同光学感测子系统。

3.转换子系统，其用于将来自测量子系统的输出信号转换成计算机可处理的数据。

4.计算机，其用于分析由转换子系统所生成的数据。

光学照射子系统提供准直而后聚焦的光束，通常为单一波长的激光，其入射到通过流通池的被流体动力学地聚焦的液流上。因此，流式细胞仪系统可具有一个或多个光源，其可以包括：

1.一个或多个灯，例如汞灯或氙灯；

2.一个或多个高功率水冷式激光器，例如氩、氪或染料激光器；

3.一个或多个低功率风冷式激光器，例如氩(488纳米)、HeNe(红 -633纳米)、HeNe(绿)和HeCd(UV)；和/或

4.一个或多个二极管激光器(蓝、绿、红和紫)。

光学感测子系统包括一个或多个检测器，其瞄准聚焦的流液通过所述光速的地方。这种检测器可包括：

1.与光束方向一致的检测器(前向散射器或FSC)；

2.垂直于光束的检测器(侧向散射器或SSC)；和

3.荧光检测器。