[发明专利]一种利用芽孢杆菌HS17发酵生产壳聚糖酶的方法及其应用

权利要求书

1.一种利用芽孢杆菌HS17发酵生产壳聚糖酶的方法，其特征在于，所述芽孢杆菌HS17为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens），所述解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）的保藏编号为CGMCC No.9532，包括如下具体步骤：

（1）菌种活化：取试管斜面保存的芽孢杆菌HS17菌种接种于活化培养基中，在30℃、200rpm下培养至菌体浑浊，制得活化种子液；所述的活化培养基为：3～6 g/L酵母粉，8～12 g/L蛋白胨，1～3 g/L磷酸二氢钾，0.5～1.5 g/L硫酸镁，pH 7.0～7.5；

（2）液体发酵生产壳聚糖酶：灭菌后的优选发酵培养基，按照7～10%（v/v）的接种量接入活化的种子培养液，在180 rpm的旋转摇床中培养，控制温度为28～30℃，发酵2～4 d后培养完毕，经离心过滤除菌后即可作为酶液使用；或者采用发酵罐培养，以65%的体积比例装入优选发酵培养基，经118℃蒸汽灭菌20 min后，按照7～10%（v/v）的比例接入活化的菌种，控制发酵过程中的pH维持在pH 6～7，调节培养温度在28～30℃，溶解氧维持在10%以上，经发酵2～4 d后发酵完毕，经离心过滤除菌后即可作为酶液使用；所述的优选发酵培养基为：55～70 g/L甘露醇，3～6 g/L大豆蛋白胨，3～6 g/L牛肉膏，0.8～1.2 g/L NH₄NO₃，1.5～2.5 g/L (NH₄)₂SO₄，1.5～2.5 g/L MnSO₄，3～5 g/L MgSO₄，0.4～0.8 g/L NaH₂PO₄，2～4 g/L K₂HPO₄，2.5～5 g/L粉末壳聚糖。