[发明专利]一种液滴数字PCR芯片及相应检测方法和检测系统在审
申请号: | 201611107369.8 | 申请日: | 2016-12-06 |
公开(公告)号: | CN108148743A | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
发明(设计)人: | 于浩洋;李彦虎 | 申请(专利权)人: | 中山百慧生物科技有限公司 |
主分类号: | C12M1/38 | 分类号: | C12M1/38;C12M1/00 |
代理公司: | 深圳壹舟知识产权代理事务所(普通合伙) 44331 | 代理人: | 吴娟;骆顺耀 |
地址: | 528437 广东省中山市火炬开*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 液滴 起始反应 储存池 储液池 液池 液储 检测系统 数字PCR 流道 种液 芯片 导流流道 检测 汇合 | ||
1.一种液滴数字PCR芯片,具有一个单元或者两个或多个相同单元,所述单元包括:
油相储液池、PCR起始反应液储液池和液滴储存池,连接所述油相储液池的流道和连接所述PCR起始反应液储液池的流道汇合,成为通向所述液滴储存池的液滴导流流道,其中所述液滴储存池部分地位于在所述油相储液池和PCR起始反应液储液池的下方,用于收集所生成的液滴并进行PCR扩增反应。
2.根据权利要求1所述的液滴数字PCR芯片,其特征在于,所述芯片具有上中下三层式结构,其中上层结构包括所述油相储液池、PCR起始反应液储液池;中层结构包括所述流道和液滴导流流道;所述液滴储存池贯穿所述上中下三层。
3.根据权利要求1或2所述的液滴数字PCR芯片,其特征在于,所述芯片由具有良好光学性和能耐受PCR反应温度的材料制成。
4.根据权利要求3所述的芯片,其特征在于,所述芯片由聚碳酸酯(PC)塑料或环烯烃共聚物(COC)材料制成。
5.根据权利要求4所述的芯片,其特征在于,所述芯片由聚碳酸酯(PC)塑料或环烯烃共聚物(COC)注塑成型。
6.根据权利要求1-6中任一项所述的芯片,其特征在于,所述油相储液池、PCR起始反应液储液池、所述流道和所述液滴储存池的上部分形成上半芯片,所述液滴储存池下部分形成下半芯片,所述上半芯片和下半芯片封接为一个整体。
7.根据权利要求6所述的芯片,其特征在于,所述上半芯片和下半芯片经热压键合封接为一个整体。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的芯片,其特征在于,在用于引导液滴进入液滴储存池的流道中的出口部分设有向下引流通道,以便这样生成的液滴流体直接汇入所述液滴储存池。
9.根据权利要求1-7中任一项所述的芯片,其特征在于,所述芯片配有用于对所述各储液池进行密封的具有米字或十字缺口的硅胶塞。
10.一种液滴PCR检测系统,包括:
根据权利要求1-9中任一项所述的PCR芯片;
用于PCR扩增反应的循环加热装置;和
PCR结果读取装置。
11.根据权利要求10所述的检测系统,其特征在于,所述PCR结果读取装置包括:吸液针和PMT光电倍增管模块。
12.根据权利要求11所述的检测系统,其特征在于,所述PCR结果读取装置还包括透明检测装置。
13.一种液滴数字PCR检测方法(200),包括以下步骤:
将油相和PCR起始反应液分别添加到油相储液池和PCR起始反应液储液池中并且施加具有预留通气孔的硅胶帽(201);
分别在所述油相储液池和PCR起始反应液储液池施加气压并持续特定时间,以便使分别来自油相储液池和PCR起始反应液储液池的液体汇合而生成大量大小均匀的小液滴(202);和
当所述生成的液滴都汇入所述液滴储存池后进行PCR扩增反应(203);和
当PCR扩增反应结束后,读取PCR反应结果(205)。
14.根据权利要求11所述的方法,其特征在于,所述方法还包括以下步骤:
当PCR扩增反应结束后,通过吸液针把经反应后的液滴从所述液滴储存池吸到透明检测装置中(204);
对位于所述透明检测装置中的液滴,读取PCR反应结果(205)。
15.根据权利要求14所述的方法,其特征在于,对位于所述透明检测装置中的液滴,使用PMT光电倍增管模块读取PCR反应结果。
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