[发明专利]一种鉴定鸡白痢沙门菌的PCR检测试剂盒有效
申请号: | 201611111312.5 | 申请日: | 2016-12-06 |
公开(公告)号: | CN106755362B | 公开(公告)日: | 2020-08-07 |
发明(设计)人: | 焦新安;李求春;徐黎娟;谢晓蕾;胡亚辰;孙林;李扬;陈祥;潘志明;耿士忠 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/42 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 李艳;许亦琳 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 白痢 沙门 pcr 检测 试剂盒 | ||
1.一种鉴定鸡白痢沙门菌的PCR检测试剂盒,所述试剂盒中包括ipaJ基因检测引物,所述ipaJ基因检测引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物和核苷酸序列如SEQID NO.2所示的反向引物。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还含有无菌水、dNTP、PCR buffer、rTaq酶、样品基因组DNA提取试剂中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还含有阳性对照或阴性对照中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于,所述阳性对照为鸡白痢ipaJ基因表达的DNA样本。
5.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于,所述阴性对照不含有鸡白痢沙门菌ipaJ基因表达的DNA样本。
6.如权利要求1~5任一权利要求所述的检测试剂盒的使用方法,所述方法为非疾病诊断目的的方法,包括如下步骤:
(1)提取样品基因组DNA;
(2)加样:将样品基因组DNA、阳性对照或阴性对照分别加入装有PCR反应体系的PCR管中,获得对应的样品反应管、阳性反应管或阴性反应管,所述PCR反应体系中含有权利要求1中的所述的ipaJ基因检测引物;
(3)PCR反应:反应管置于PCR仪上,设置循环参数,进行PCR反应;
(4)PCR反应结束后,分析结果。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,PCR反应的条件设置为:PCR反应的条件设置为:94℃预变性3min,再进行如下循环:94℃30sec,62℃40sec,72℃50sec,30个循环,最后72℃延伸10min。
8.如权利要求1~5任一权利要求所述的检测试剂盒在制备ipaJ基因检测产品中的用途。
9.根据权利要求8所述的用途,其特征在于,所述检测产品用于检测和筛选鸡白痢沙门菌。
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