[发明专利]一组与先天性代谢缺陷病相关的基因新突变及检测试剂盒

说明书

本发明公开了一组与先天性代谢缺陷病相关的基因新突变及检测试剂盒。本发明所提供的先天性代谢缺陷病相关基因新突变得到的产品为：D1)MUT基因发生c.1874A>C杂合突变得到的蛋白质，为发生p.Asp625Ala突变得到的蛋白质；D2)MUT基因发生c.470T>A杂合的到的蛋白质，为发生p.Val157Asp突变得到的蛋白质；D3)编码MUT基因c.1874A>C杂合突变蛋白质的DNA分子或cDNA分子；D4)编码MUT基因c.470T>A突变蛋白质的DNA分子或cDNA分子；本发明的与先天性代谢缺陷病相关的两个新发突变对开展先天性代谢缺陷病的分子诊断具有重要意义。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一组与先天性代谢缺陷病相关的基因新突变及检测试剂盒。

背景技术

先天性代谢缺陷病(Inborn errors of metabolism，IEM)是指由于基因突变而引起酶缺失、细胞膜功能异常或受体缺陷，从而导致机体生化代谢紊乱，造成中间或旁路代谢产物蓄积，或终末代谢产物缺乏，引起一系列临床症状的一组疾病。先天性代谢缺陷病多为常染色体隐性遗传病，少数为常染色体显性遗传或X、Y连锁伴性遗传及线粒体遗传等。自1908年Garrod提出先天代谢缺陷病的概念以来，迄今发现的疾病已有500余种，并随着新的诊断技术的增加而逐渐增多。先天性代谢缺陷病虽单一疾病发病率低，但累积发病率高，5000个新生儿中约有1个患有先天性代谢缺陷病。

先天性代谢缺陷病按其所涉及的代谢底物异常可直接分为氨基酸病(如苯丙酮尿症)、有机酸血症(如异戊酸血症)、脂肪酸氧化缺陷(如中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症)、过氧化酶体病(如Zellweger综合症)、糖代谢病(如半乳糖血症)、核酸代谢异常症(如腺嘌呤脱氧酶缺乏症)、溶酶体病(如粘多糖病)和金属代谢障碍(如Wilson病)等。根据异常代谢物的分子大小，可将先天性代谢病分为小分子病(如氨基酸病、有机酸代谢异常)和细胞器病(如脂类代谢病)。

由于遗传的异质性，临床表现复杂，重者在新生儿期、疾病的急性发作期死亡，存活者多留有神经系统及其他脏器损伤的症状及体征。先天性代谢缺陷病患者在任何年龄均可发病。发病年龄不同，临床表现各异。一般发病年龄越早、预示病情重、死亡率高。由于新生儿对疾病的反应能力弱，临床主要表现为拒奶、呕吐、腹泻、脱水、嗜睡、肌张力异常、惊厥、呼吸困难等非特异性的表现。

部分先天性代谢缺陷病可以进行治疗。新生儿及早发现先天性代谢缺陷病后，可对症治疗，挽救生命，减少神经系统后遗症。如婴儿患有甲基丙二酸尿症，可进行肌肉注射1mg的维生素B12进行治疗，并选择低蛋白饮食。

先天性代谢缺陷病的疾病种类多，大部分有多个致病基因。传统的检测方法有酶免疫分析法、液相串联质谱仪(LC-MS/MS)技术、PCR技术、Sanger测序技术等。酶免疫分析法检测成本低、但一次只能检测一种疾病，且容易受样本采集的影响，具有一定假阳性和假阴性率。液相串联质谱仪技术检测成本低，能一次检测30多种先天性代谢缺陷病，但无法确定疾病相关的致病突变。PGR技术、Sanger测序技术能确定疾病相关的致病突变，但一次只能检测一个基因的一个或几个突变，通量低。

因此采用上述方法很难对多种先天性代谢缺陷病同时进行检测并确定致病突变，检出率低，临床上很难对疾病进行确诊。

自人类基因组计划后发展起来的新一代高通量测序技术，因其通量高，迅速占领了市场。近几年，新一代高通量测序技术不断完善，检测变异的准确性也逐步提高，与此同时，衍生起来的靶向重测序技术大大降低了检测成本，在遗传性疾病检测应用中极具前景。

发明内容

本发明发现了编码甲基丙二酸单酰辅酶A变位酶的基因MUT基因的复合型杂合突变：错义突变c.1874A＞C(p.Asp625Ala)和错义突变c.470T＞A(p.Val157Asp)。所要解决的技术问题是如何诊断先天性代谢缺陷病或筛查先天性代谢缺陷病患者。