[发明专利]用于检测丁酰胆碱酯酶的近红外半菁类荧光探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种近红外半菁类荧光探针，其特征在于，所述近红外半菁类荧光探针具有式(1)所示的结构：

2.权利要求1所述的近红外半菁类荧光探针的制备方法，其特征在于，该方法包括在亲核反应条件和缚酸剂存在下，在有机溶剂中，将式(2)所示的化合物与环丙基甲酰氯接触；

3.根据权利要求2所述的制备方法，其中，相对于1毫摩尔的式(2)所示结构化合物，所述环丙基甲酰氯的用量为1-2毫摩尔，所述缚酸剂的用量为1-3毫摩尔，所述有机溶剂的用量为20-30毫升。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其中，所述缚酸剂选自三乙胺、二乙胺、二异丙基胺、吡啶、N,N-二甲氨基吡啶、2,6-二甲基吡啶、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠和碳酸氢钠中的至少一种；所述有机溶剂选自二氯甲烷、四氢呋喃、氯仿、四氯化碳、乙腈、丙酮、乙二醇二甲醚、N,N-二甲基甲酰胺和1,2-二氯乙烷中的至少一种。

5.根据权利要求2-4中任意一项所述的制备方法，其中，所述亲核反应条件包括：温度为零下5℃至30℃，时间为10-120min。

6.权利要求1所述的近红外半菁类荧光探针在检测丁酰胆碱酯酶的活性中的应用。

7.一种丁酰胆碱酯酶活性的检测方法，其特征在于，该方法包括：

将待测样品与权利要求1中所述的近红外半菁类荧光探针接触，使得待测样品中的丁酰胆碱酯酶被所述红外半菁类荧光探针中的环丙甲酰基所识别，得到接触后的物料HCY；

检测接触后的物料HCY在激发光下发出的荧光强度随时间的增加值，所述荧光强度随时间的增加值指示了待测样品中丁酰胆碱酯酶的活性；所述激发光的波长为450-750nm，所述荧光的发射波长为680-800nm。

8.权利要求7所述的检测方法，其中，相对于1μg/mL的丁酰胆碱酯酶，所述近红外半菁类荧光探针的用量为0.05-100μM。

9.权利要求7或8所述的检测方法，其中，接触的条件包括：温度为25-37℃，pH值为5-9，时间为10-30min。

10.一种丁酰胆碱酯酶活性的检测试剂盒，该检测试剂盒包括：权利要求1所述的近红外半菁类荧光探针、丁酰胆碱酯酶标准品以及反应缓冲液。