[发明专利]一种自凝集丙酸产甲烷菌剂的驯化方法有效
| 申请号： | 201611127327.0 | 申请日： | 2016-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN106701617B | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 李颖;孙永明;袁振宏;孔晓英;李连华;王忠铭 | 申请（专利权）人： | 中国科学院广州能源研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/36;C12P5/02 |
| 代理公司： | 44001 广州科粤专利商标代理有限公司 | 代理人： | 蒋欢妹;莫瑶江 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 丙酸 胞外聚合物 凝集 产甲烷菌剂 沼气发酵液 培养基 产甲烷 驯化 选择性培养基 乙酸 产甲烷菌 发酵体系 降解产物 沼气发酵 产气率 接种物 可降解 凝集体 球团状 产气 放入 降解 菌团 可用 酸败 厌氧 摇床 分泌 微生物 接种 新鲜 积累 | ||
1.一种自凝集丙酸产甲烷菌系的驯化方法，其特征在于，该方法以沼气发酵液的胞外聚合物为接种物，以丙酸为碳源，该方法包括以下步骤：取分泌胞外聚合物的沼气发酵液，分离得到胞外聚合物接种到丙酸产甲烷的选择性培养基中，放入厌氧瓶摇床中37℃进行培养3-4周直至培养基中出现球团状的微生物凝集体；再取菌团加入新鲜的培养基，培养7-10天驯化得到的自凝集丙酸产甲烷菌团；所述选择性培养基配制方法为：在1L水中加入400mgNH4Cl、250mg MgSO4·6H2O、400mg KCl、120mg CaCl2·2H2O、80mg(NH4)2HPO4、55mg FeCl3·6H2O、5000mg NaHCO3，还加入CoCl2·6H2O、NiCl2·6H2O、MnCl2·4H2O、CuCl2·2H2O、AlCl3·6H2O、ZnCl2、Na2WO4·2H2O、H3BO3、Na2SeO3、Ma2MoO4·2H2O各0.0005mg，此外还加入丙酸钠4200mg，pH调节至7.0。
2.根据权利要求1所述的自凝集丙酸产甲烷菌系的驯化方法，其特征在于，所述分泌胞外聚合物的沼气发酵液，其判断方法为，大于10000rpm的转速下离心沼气发酵液10-15min后，出现发酵液分为三层的现象，上层清澈透明，中间层粘稠乳白色，底层含固体杂质黑色。
3.根据权利要求1所述的自凝集丙酸产甲烷菌系的驯化方法，其特征在于，所述的分离得到胞外聚合物，指大于10000rpm的转速下离心分泌胞外聚合物的沼气发酵液10-15min后，发酵液分为三层，去掉上层的澄清透明液体及底层的固体沉淀，收集中间层的粘稠乳白色物质，大于10000rpm的转速下再次离心粘稠乳白色物质15min，收集沉淀的菌泥作为接种物。
4.一种自凝集丙酸产甲烷菌剂的应用，其特征在于，权利要求1驯化后得到的自凝集丙酸产甲烷菌用于生物强化沼气发酵。
5.一种自凝集丙酸产甲烷菌固体菌剂的制备方法，其特征在于，将权利要求1驯化后得到的自凝集丙酸产甲烷菌的菌液经离心，弃去液体部分后置于厌氧环境下室温风干，收集固体粉末并真空密封保存得到目标产物。
6.一种液体浓缩自凝集丙酸产甲烷菌剂的制备方法，其特征在于，将权利要求1驯化后得到的自凝集丙酸产甲烷菌菌液经离心，收集全部的固体沉淀及少许上清液，利用灭菌的液体甘油封液面以隔绝空气，-20℃保存。
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