[发明专利]一种测定玛卡中腺嘌呤含量的新方法

说明书

本发明涉及循环伏安分析与化学修饰电极领域，具体涉及一种测定玛卡中腺嘌呤含量的电极制作和电化学分析方法。该方法依次用邻苯二胺、β‑环糊精、银‑碳纳米管修饰玻碳电极、制备出了可用于测定玛卡中腺嘌呤含量的电化学传感器。该发明的关键特征是将碳纳米管加入到AgNO₃溶液中，然后将修饰过的玻碳电极放入其中并在电化学条件下扫描。结果表明，该修饰电极对腺嘌呤的电催化效果明显。该方法灵敏、简便、重现性好，应用此方法能够准确的测定玛卡中腺嘌呤的含量。与测定腺嘌呤的传统方法相比较，本发明操作简单，测试成本低并且易于操作。该方法也可应用于其他腺嘌呤药物有效成分含量的测定。

技术领域

本发明涉及循环伏安分析与化学修饰电极领域，具体涉及一种测定玛卡中腺嘌呤含量的电极制作和电化学分析方法。

背景技术

玛卡(学名：Lepidium meyenii Walp)，原产于南美洲秘鲁安第斯山脉4000米左右的一种十字花科植物，数千年来一直是当地印加人的主要食物来源，有着抗疲劳和提高生育力的神奇功效，被土著居民称之为“安第斯山神赐予人类的礼物”，也有着“南美人参”的美誉。

玛卡富含55种活力营养素，独有的玛卡烯、玛卡酰胺是玛卡提取物中具有促进性功能勃起，提高精子数量，并促进其活力的有效物质之一，它可以刺激人体内荷尔蒙分泌平衡，达到修复生理机能的效果，这个功能让玛卡成为全球十大保健品之一，享誉世界。此外玛卡还富含碱基(如腺嘌呤、鸟嘌呤等)、蛋白质、糖类、脂肪酸(含较多α-亚麻酸、亚油酸)、膳食纤维，20种氨基酸(天冬氨酸、精氨酸等)、多种矿物质(铁、锰、铜、锌、钠、钾、钙、磷、硫、镁等)、8种维生素(VB1、VB2、VB5、VB6、VB12、VC、VA、VE)，多种生物碱以及芥子油苷、牛磺酸、植物多酚、皂角苷等生物活性成分。玛卡的生理活性与其化学组成有着密切的关系，其中腺嘌呤等生物碱基是其抗疲劳、抗衰老的主要成分之一，同时，腺嘌呤也是脱氧核糖核酸的重要组成部分，在包括细胞能量转移和酶催化的信号传递等许多生物过程中都有重要的作用。2005年《中国药典》中已经把腺嘌呤核苷的含量作为评价冬虫夏草的质量指标。

目前，常用于中药有效成分含量的测定方法主要有核磁共振波谱法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、气质联用法、薄层色谱扫描法等，但上述检测方法往往仪器昂贵、过程复杂、灵敏度差。

发明内容

本发明提供了一种测定玛卡中腺嘌呤含量的新方法，该方法与传统方法相比较，具有操作简单、测试成本低、重现性好和灵敏度高等特点。

本发明提供的技术方案为：

一种测定玛卡中腺嘌呤含量的新方法，该方法采用邻苯二胺/β-环糊精/银-碳纳米管修饰电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，应用循环伏安法选择性测定玛卡中腺嘌呤的含量。具体包括以下步骤：

一、复杂样品环境下腺嘌呤选择性测定电极的制作

(1)修饰电极预处理

①用砂纸将新玻碳电极(GCE)表面磨平，然后用Al₂O₃抛光粉抛光电极表面，直至电极表面显像出镜面；

②在蒸馏水中超声清洗GCE后，取出用水洗净，在电解池中加入0.5mol/L H₂SO₄溶液，连接三电极系统，接通电极连线，设置扫描参数：起始电位-0.2mV，终止电位0.6V，扫描速度为100mV/s，取样间隔2mV，量程100mA，进行循环扫描极化处理，电脑同时记录I-E曲线，至循环伏安(CV)曲线稳定为止；

(2)修饰电极制备

①将电解池中溶液更换为5mmol/L铁氰化钾溶液，将步骤(1)②处理后的GCE置于5mmol/L铁氰化钾溶液中，按照步骤(1)②设置的扫描参数用循环伏安法(CV)扫描至稳定，将该电极取出用水冲洗干净后，在红外灯下干燥；