[发明专利]A型尼曼‑皮克病的基因治疗

说明书

本申请是申请日为2007年2月8日、中国申请号为200780009401.1、发明名称为“A型尼曼-皮克病的基因治疗”的发明申请的分案申请。

相关申请的交互参考

本申请要求根据美国专利法第119条(e)项(35U.S.C.§119(e))的2006年2月8日申请的美国临时申请第60/771,628号，2006年2月9日申请的美国临时申请第60/772,360号的优先权，上述申请案的内容通过引用并入本公开中。

技术领域

本发明涉及治疗影响脑和内脏的疾病如A型尼曼-皮克病的组合物和方法。

发明内容

一组称为溶酶体贮积症(lysosomal storage diseases，LSD)的代谢性疾病包括超过40种遗传疾病，其中许多涉及不同溶酶体水解酶的遗传缺陷。表1列出了有代表性的溶酶体贮积症和相关的缺陷酶。

表1

*影响中枢神经系统

LSD的标志性特征是溶酶体中代谢物的异常积累，其导致在核周体中形成大量膨胀的溶酶体。对LSD治疗的主要困难(相对于肝特异性酶病的治疗而言)在于需要在多个单独的组织中逆转溶酶体贮积病变。有些LSD可通过静脉输注缺失的酶有效的治疗，称为酶替代疗法(enzyme replacement therapy,ERT)。例如，仅有内脏病的戈谢1型病人对重组葡萄糖脑苷脂酶(Genzyme Corp.)的ERT有良好反应。然而，患有影响CNS的代谢病的病人(例如2型或3型戈谢病)并不完全对静脉内ERT有反应，因为替代酶被血脑屏障(BBB)阻止而不能进入脑。此外，早期试图通过直接注射蛋白将替代酶引入脑的行为部分受限，这是由于局部高浓度酶的毒性以及脑实质中扩散率有限(Partridge,Peptide Drug Delivery to the Brain,Raven Press,1991)。

另外，可能会产生抗酶替代疗法中使用的输注的酶的抗体。该抗体可能没有临床意义，也可能导致超敏反应或降低治疗蛋白的生物利用度。Hunley,T.E.et al.(2004)Pediatrics 114(4):e532-e535。例如，Kakkis E.et al.(2004)PNAS 101(3):829-834报道在粘多糖贮积症I型(mucopolysaccharidosis I，MPS I)犬模型中已经观察到抗体对溶酶体贮积症酶替代疗法的不利作用。在MPS疾病包括MPS I、MPS VI和MPS VII的其他动物模型中，他们也报道了相似的结果。降低这些蛋白引起的免疫应答可能是合乎需要的。诱导抗原特异性耐受是降低这样的免疫应答的可能的方法，但是据报道难以实现。

基因疗法是刚出现的治疗影响CNS的疾病，包括LSD的治疗方式。在认可的动物模型中人们已经获得用基因疗法治疗A型尼曼-皮克病(Neimann-Pick Type A，NPA)的有希望的结果。Dodge et al.(2005)PNAS 102(49):18722-17827。NPA是由酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase，ASM)活性缺陷引起的溶酶体贮积症。ASM活性的缺失导致溶酶体鞘磷脂(sphingomyelin，SPM)的积累，继发的代谢缺陷如异常胆固醇代谢，进而导致包括中枢神经系统(central nervous system，CNS)的器官系统的细胞功能缺失。Schuchman and Desnick,The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease,McGraw-Hill,New York,pp.3589-3610和Horinouchi et al.(1995)Nat.Genet.10:288-293。

本发明提供包括下述步骤的方法：将有效量的含有编码免疫原转基因的病毒载体给予哺乳动物的肝组织，然后将有效量的含有编码免疫原转基因的第二病毒载体给予哺乳动物的脑。

本发明也提供治疗哺乳动物A型尼曼-皮克病的方法，包括下述步骤：将有效量的含有编码酸性鞘磷脂酶多肽转基因的病毒载体给予哺乳动物的肝组织，然后将有效量的含有编码酸性鞘磷脂酶多肽转基因的第二病毒载体给予所述哺乳动物的脑，由此治疗哺乳动物的A型尼曼-皮克病。