[发明专利]玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法在审
申请号: | 201611146426.3 | 申请日: | 2016-12-13 |
公开(公告)号: | CN106596766A | 公开(公告)日: | 2017-04-26 |
发明(设计)人: | 张易;马晋芳;葛发欢;张陈;彭银;叶静;周飞贤 | 申请(专利权)人: | 中山大学;广州中大南沙科技创新产业园有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 广州凯东知识产权代理有限公司44259 | 代理人: | 陈晓清 |
地址: | 510000 广东省广州市南*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 玛咖超 临界 co2 提取物 中玛咖酰胺 含量 分析 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种玛咖酰胺B含量的分析方法,尤其涉及玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法。
背景技术
玛咖是十字花科独行菜属一年生或两年生草本植物。玛咖块根中含有丰富的营养物质及次生代谢产物。研究结果表明,玛咖具有抗疲劳、改善性功能、提高生育能力、减少前列腺增生、缓解更年期综合症、等多种功效,超临界CO2萃取能较好的富集玛咖酰胺。玛咖酰胺是玛咖中特有的功效成分,N-苄基十六烷酰胺是一种玛咖酰胺类成分,N-苄基十六烷酰胺又名玛咖酰胺B,N-苄基十六烷酰胺具有延长小鼠负重游泳时间、增强小鼠抗疲劳作用。然而,目前没有对玛咖提取物中N-苄基十六烷酰胺含量准确分析方法。
发明内容
针对上述背景中的问题,本发明提供一种准确性高的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法。
本发明的目的将通过以下技术方案实现:玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法,包括以下步骤:
(1)溶液的配制:包括N-苄基十六烷酰胺标准品溶液和玛咖测试品溶液,N-苄基十六烷酰胺标准品溶液通过将N-苄基十六烷酰胺溶解在甲醇中制得,玛咖测试品溶液通过将玛咖超临界CO2提取物溶解在甲醇中过滤后得到;
(2)标准线的绘制:测定不同浓度的N-苄基十六烷酰胺标准品溶液的液相色谱,得出不同浓度的N-苄基十六烷酰胺的峰面积,并根据N-苄基十六烷酰胺的浓度与峰面积,拟合标准线;
(3)浓度计算:测定玛咖测试品溶液的液相色谱,得出玛咖测试品中N-苄基十六烷酰胺的峰面积,通过标准线,从而计算出玛咖超临界提取物中N-苄基十六烷酰胺的含量。
优选的,所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法,所述玛咖测试品溶液将玛咖超临界提取物溶解在甲醇中,采用0.45μm微孔滤膜进行过滤。
优选的,所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法,所述液相色谱采用反相C18色谱柱。
优选的,所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法,所述液相色谱的流动相为乙腈-水或者乙腈-酸,其中酸的体积分数为0.5%-1.0%。
优选的,所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法,所述酸为甲酸、冰乙酸、三氟乙酸、磷酸中的一种或多种。
优选的,所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法,所述液相色谱的检测波长为210-260nm。
优选的,所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法,所述液相色谱的柱温为25-40℃。
优选的,所述的玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法,所述液相色谱的流速为0.6-1.0ml/min。
本发明的有益效果是:本发明的分析方法不仅精密度高、重复性好,而且稳定性优异,回收率高。另外,本发明所述液相色谱测试N-苄基十六烷酰胺的峰面积,N-苄基十六烷酰胺峰的分离度大,选择性好,灵敏度高。
附图说明
图1为本发明实施例2中玛咖测试品的液相色谱图;
图2为本发明实施例3中N-苄基十六烷酰胺标准品溶液的液相色谱图。
具体实施方式
为更好地理解本发明,下面通过以下实施例对本发明作进一步具体的阐述,但不可理解为对本发明的限定,对于本领域的技术人员根据上述发明内容所作的一些非本质的改进与调整,也视为落在本发明的保护范围内。
实施例1
玛咖超临界CO2提取物中玛咖酰胺B含量的分析方法,包括以下步骤:
(1)溶液的配制:包括N-苄基十六烷酰胺标准品溶液和玛咖测试品溶液,N-苄基十六烷酰胺标准品溶液通过将N-苄基十六烷酰胺溶解在甲醇中制得,玛咖测试品溶液将玛咖超临界提取物溶解在甲醇中,采用0.45μm微孔滤膜进行过滤得到;
(2)标准线的绘制:测定不同浓度的N-苄基十六烷酰胺标准品溶液的液相色谱,得出不同浓度的N-苄基十六烷酰胺的峰面积,并根据N-苄基十六烷酰胺的浓度与峰面积,拟合标准线;
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