[发明专利]一种抗草甘膦玉米品种鉴定方法

说明书

技术领域

本申请属于农业品种鉴定技术领域，具体涉及一种抗草甘膦玉米品种鉴定方法的专利申请。

背景技术

近年来，中国玉米年种植面积超过了5.5亿亩，为我国第一大粮食作物。杂草是玉米生产过程中的主要危害之一，每年造成的损失约为总产量的10%。人工除草由于不能适应现代农业生产需求，已基本上被化学除草等方式替代。草甘膦与其他除草剂相比，具有价格低、高效、广谱、低毒、无残留等特点，且抗性杂草常年保持在相对较低的水平，所以已连续多年排行世界农药销售额首位。

草甘膦为灭生性除草剂，对植物无选择性，只能适应播前或荒地等除草，因此通过基因工程等手段，培育出抗草甘膦的作物是其扩大应用的先决条件。1996~2015年间，转基因作物种植面积扩大了100多倍，其中转基因玉米累计种植面积达到了90亿亩。目前，得到商业化应用的抗草甘膦转基因玉米主要有孟山都公司的GA21、MON801、MON802、MON809、MON832、MON87427、NK603、MON88017和先锋公司的98140等。国内转基因抗草甘膦玉米尚未商业化应用，研发和安评申请较为领先的玉米品种有浙江大学的双抗12-5、中国农业大学的CC-2、大北农公司的C0030.3.5和奥瑞金公司转mG2-aroA基因的抗草甘膦玉米等。此外，赵锦慧等（应用诱变法筛选玉米抗草甘膦突变株系的研究，河南农业科学，2011,，40(4): 49-52）2011年报道了通过诱变法获得了2株抗草甘膦玉米和通过体细胞筛选法获得抗草甘膦玉米突变体，但迄今为止未见相关后续报道。

现有技术中，针对草甘膦抗性玉米品种鉴定，主要采用室外喷施草甘膦除草剂（农达）进行抗草甘膦玉米抗性鉴定方法进行，其主要操作方法为：在合适的气候条件下，在玉米长到4~6叶期后喷施草甘膦，喷完药后1周左右进行鉴定。这种鉴定方法具有比较明显的占用空间大、操作时间长、应用环境较为受限等缺陷，加上草甘膦药效容易受到喷药时温度、光照、降水等天气因素的自然影响，因而导致该方法的鉴定结果不够稳定，应用条件较为受限。因此，探讨一种易于操作的、快速高效的草甘膦抗性玉米品种鉴定方法，对于玉米品种筛选、品种推广具有十分重要的意义。

发明内容

本发明目的在于提供一种操作较为简便的、草甘膦抗性玉米品种的鉴定方法，从而为玉米品种筛选和培育奠定一定的应用基础。

本申请的技术方案详述如下。

一种抗草甘膦玉米品种鉴定方法，具体包括如下步骤：

（1）将待检玉米种子置于草甘膦质量浓度为0.1~2.0%的清水溶液中进行浸种，室温（18~25℃）条件下，浸泡8~24h；

优选草甘膦浓度不低于0.5%；

同时设置清水对照；

（2）将步骤（1）中浸种后玉米种子25~28℃、16 h光/8 h暗条件下进行培养；

培养时，玉米种子可置于营养钵中、沙盘中或摆放于铺有滤纸的培养皿中进行培育，营养钵中，营养土与蛭石按1:1混匀；滤纸用清水浸湿；

（3）对步骤（2）中玉米种子的出苗率、幼苗全株鲜重、根长、茎长、叶重和叶片叶绿素含量等形态指标与生理指标进行统计，

在步骤（2）的玉米种子培养6d后，再对出苗率进行统计；

在步骤（2）的玉米种子培养7d后，再对幼苗全株鲜重和叶重进行称量、统计；

在步骤（2）的玉米种子培养7d后，再对幼苗根长和茎长分别进行测量；

在步骤（2）的玉米种子培养7d后，再对幼苗叶片叶绿素含量进行测定；

并与清水对照组进行对比，如果各项指标均未发生显著变化，则可认为待检玉米种子为抗草甘膦玉米品种。

所述抗草甘膦玉米品种鉴定方法，检测过程中，优选单独或者同时加入待检玉米品种的遗传背景亲本和非抗草甘膦玉米品种作为对照组；所述非抗草甘膦玉米品种具体例如为杂交种郑单1002；在浸种液中草甘膦浓度不小于0.5 %时，郑单1002种子不能发芽。

所述抗草甘膦玉米品种鉴定方法，所述待检玉米品种，具体例如对抗草甘膦玉米CC-2品种的检测，对应的，抗草甘膦玉米CC-2品种的背景亲本为郑58；郑58为非抗草甘膦品种，与抗草甘膦玉米CC-2品种基因组相比，其缺少抗草甘膦基因，在浸种液中草甘膦浓度不小于0.1 %时，郑58种子发芽率显著降低，即使发芽种子也全部表现为明显草甘膦危害的症状。