[发明专利]一种鸭沙门氏菌灭活疫苗的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种鸭沙门氏菌灭活疫苗的制备方法，具体步骤如下：从当地肉鸭养殖场内选取感染鸭沙门氏菌的肉鸭，分离出鸭沙门氏菌；将鸭沙门氏菌进行扩大培养，灭活，4℃保存备用；配制佐剂：佐剂由以下重量份数的原料组成：司盘‑80 0.8‑1.2份，吐温‑80 1.5‑2.5份，蜂胶 1.5‑2.5份，按重量配比称取司盘‑80、吐温‑80和蜂胶，混合均匀；将灭活的鸭沙门氏菌稀释至其浓度大于5×109 CFU/mL，再将佐剂加入到菌液中，混合均匀，即可得到灭活鸭沙门氏菌疫苗。本发明的提供的鸭沙门氏菌灭活疫苗针对性强，对当地流行的沙门氏菌菌株免疫效果好，制备工艺操作简单，成本较低，易于储存，适用于有实验室的规模性养殖场。

技术领域

本发明属于生物制品技术领域，具体涉及一种鸭沙门氏菌灭活疫苗的制备方法及其应用。

背景技术

沙门氏菌是肠杆菌科成员，超过2500个血清型，在自然界分布广泛，几乎所有动物都能发生感染。

雏鸭很容易感染沙门氏菌，尤其是出壳后几天到三周龄的雏鸭，死亡率达10～60%。沙门氏菌在自然界中分布很广，大多数鸭场普遍存在，特别是环境卫生较差的鸭场，因此，鸭群接触传染源的机会很多。另外，有研究发现沙门氏菌可在许多健康鸭只的盲肠内寄居，当饲养管理不善、环境卫生恶劣、天气骤变、长途运输等应激时，造成鸭只抵抗力下降或肠道菌群紊乱，促使沙门氏菌进入内脏器官而引起发病，因而有“条件性疾病”之称。

规模化养殖场如果感染沙门氏菌，除去引起发病死亡之外，往往长期带毒并间歇排毒，当人接触这些健康带菌动物、或食用被沙门氏菌污染的畜禽产品时就很容易发生感染，轻则造成自限性腹泻，重则可引起系统性疾病（如伤寒热），由此可见，沙门氏菌是相当重要的人畜共患病。

沙门氏菌血清型如此繁多，所以在疫苗免疫方面，虽然多价灭火疫苗应用范围很广，效果也不错，但是，依然有很多养殖地区的血清型跟免疫的疫苗对不上，导致免疫效果不理想，这也是目前市场普遍存在的问题。因此，研制出有效的当地疫苗具有重大的现实意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是当地疫苗血清型不符，为解决上述问题，本发明提供一种鸭沙门氏菌灭活疫苗的制备方法及其应用。

本发明的目的是以下述方式实现的：

一种鸭沙门氏菌灭活疫苗的制备方法，具体步骤如下：

（1）从当地肉鸭养殖场内选取感染鸭沙门氏菌的肉鸭，分离出鸭沙门氏菌；

（2）将步骤（1）分离得到的鸭沙门氏菌进行扩大培养，灭活，4℃保存备用；

（3）配制佐剂：所述佐剂由以下重量份数的原料组成：司盘-80 0.8-1.2份，吐温-801.5-2.5份，蜂胶 1.5-2.5份，按重量配比称取司盘-80、吐温-80和蜂胶，混合均匀；

（4）将灭活的鸭沙门氏菌稀释至其浓度大于5×109 CFU/mL，再将步骤（3）制备的佐剂加入到菌液中，混合均匀，即可得到灭活鸭沙门氏菌疫苗；

其中，鸭沙门氏菌菌液与佐剂的质量比为（2-4）：（6-8）。

所述步骤（2）具体步骤为：将步骤（1）分离得到的鸭沙门氏菌接种到普通营养琼脂平板上，挑选边缘整齐、表面有光泽、湿润、光滑的单株菌落接种到LB肉汤中，37℃下震荡10h，经过细菌计数后加入质量分数为0.4%的福尔马林灭活， 24h后进行无菌检验，无菌检验合格后， 4℃保存备用。

所述步骤（3）中的佐剂由以下重量份数的原料组成：司盘-80 1份，吐温-80 2份，蜂胶2份。

所述步骤（4）中鸭沙门氏菌菌液与佐剂的质量比为3：7。

一种鸭沙门氏灭活疫苗，该鸭沙门氏灭活疫苗是用权利要求1-4任一所述的鸭沙门氏灭活疫苗的制备方法制备而得的。