[发明专利]科尔维尔氏菌属嗜冷新菌种及其培养方法与应用有效
申请号: | 201611159344.2 | 申请日: | 2016-12-15 |
公开(公告)号: | CN106754501B | 公开(公告)日: | 2019-07-09 |
发明(设计)人: | 陈新华;张聪;郭文斌;王玉光 | 申请(专利权)人: | 自然资源部第三海洋研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/52;C12N9/16;C12N9/26;C12R1/01 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361005 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 菌属 新菌种 淀粉酶 应用 低温蛋白酶 海洋微生物 保藏 碱基序列 液体发酵 培养基 酯酶 接种 基因 生产 | ||
科尔维尔氏菌属嗜冷新菌种及其培养方法与应用,涉及海洋微生物。所述科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097‑1,保藏编号为CCTCC NO:M 2016597。科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097‑1的培养:将科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097‑1接种于培养基中,在培养温度4~25℃,pH 6.4~9.7,质量百分浓度为1%~6%的NaCl条件下进行培养。科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097‑1的16S rRNA基因序列为SEQ所示的碱基序列。可在液体发酵生产低温蛋白酶、酯酶和淀粉酶中应用。
技术领域
本发明涉及海洋微生物,尤其是涉及科尔维尔氏菌属嗜冷新菌种及其培养方法与应用。
背景技术
科尔维尔氏菌属由Deming等人在1988年提出建立的,模式菌种为Colwelliapsychrerythraea。目前科尔维尔氏菌属共包括14个种,全部分离自海水环境。菌属特征为杆状或曲杆状细胞,革兰氏阴性,不产生孢子,具运动性,兼性厌氧,大部分生活于低温海水环境。
多相分类的概念最初由Colwell于1970年提出,是指利用微生物多种不同的信息,包括表型的、基因型的和系统发育的信息,综合起来研究微生物分类和系统进化的过程。其中DNA同源性分析是确定正确的分类地位的最直接的方法,而DNA-DNA杂交可以在总体水平上研究微生物间的关系,用于种水平上的分类学研究。1987年,国际系统细菌学委员会规定,DNA同源性≥70%为细菌种的界限。
低温酶由于其低温催化活性以及热不稳定性在工业应用上具有中温酶无法比拟的优势:可以通过温和的热处理使低温酶失活,快速而经济地终止反应;生产过程在低温或室温下进行,无需加热和冷却,可以降低成本。在食品、医药以及化工等行业较中温酶具有较大的优越性。科尔维尔菌属中大部分微生物都为嗜冷微生物,而且可以产生丰富的低温蛋白酶、淀粉酶和酯酶,在食品、医疗以及化工等行业显示出很好的应用前景。
发明内容
本发明的目的之一在于提供科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097-1。
本发明的目的之二在于提供科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097-1的培养方法。
本发明的目的之三在于提供科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097-1的16S rRNA基因序列。
本发明的目的之四在于提供科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097-1在液体发酵生产低温蛋白酶、酯酶和淀粉酶中的应用。
所述科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097-1,已于2016年10月27日保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国武汉武汉大学,邮编:430072,保藏中心保藏编号为CCTCCNO:M 2016597。
所述科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097-1的培养方法如下:
将科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097-1接种于培养基中,在培养温度4~25℃,pH 6.4~9.7,质量百分浓度为1%~6%的NaCl条件下进行培养。
所述培养基可采用海洋细菌常规培养基,优选2216E培养基。
所述培养温度优选10~13℃,pH优选7.0~9.7,NaCl质量百分浓度优选2%~3%。
所述培养可在需氧条件下进行,培养可以是各种微生物的培养方式,可采用液体培养、固体培养、半固体培养、摇床培养或发酵罐发酵。
所述培养的接种量为常规,按体积百分比优选1%~2%。
所述科尔维尔菌属(Colwellia sp.)NB097-1的16S rRNA基因序列为SEQ所示的碱基序列。
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