[发明专利]一种光调控启动子降低黑曲霉β-葡萄糖苷酶表达酶活的方法有效
申请号: | 201611159371.X | 申请日: | 2016-12-15 |
公开(公告)号: | CN106755052B | 公开(公告)日: | 2021-03-16 |
发明(设计)人: | 薛栋升;梁龙元 | 申请(专利权)人: | 湖北工业大学 |
主分类号: | C12N15/80 | 分类号: | C12N15/80;C12N1/15;C12R1/685 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 常海涛 |
地址: | 430068 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 调控 启动子 降低 曲霉 葡萄 糖苷酶 表达 方法 | ||
1.一种光调控启动子降低黑曲霉β-葡萄糖苷酶表达酶活的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)将由含光调控启动子的DNA序列、表达与β-葡萄糖苷酶mRNA互补的反义mRNA的DNA序列和终止子序列组成的DNA片段构建到表达载体上;所述的含光调控启动子的DNA序列如SEQ ID NO.1所示;所述的表达与β-葡萄糖苷酶mRNA互补的反义mRNA的DNA序列如SEQ IDNO.2所示;所述的终止子序列如SEQ ID NO.3所示;
(2)将步骤(1)所构建的重组载体转化到黑曲霉中;
(3)转化有重组载体的黑曲霉菌株在光照条件下进行培养,所述的光照条件为蓝光。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的表达载体为pCAMBIA1301载体。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)为:将序列如SEQ ID NO.4所示的DNA片段通过限制性内切酶
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的黑曲霉为黑曲霉ATCC16404。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)通过农杆菌将所构建的重组载体转化到黑曲霉中。
6.一种黑曲霉菌株,其特征在于:为权利要求1-5任一项中构建的转化有重组载体的黑曲霉菌株。
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