[发明专利]一种检测瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1的酶联免疫试剂盒

说明书

本发明公开了一种检测瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1的酶联免疫试剂盒。本发明所提供的检测瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1的酶联免疫试剂盒，包括包被的黄曲霉毒素B1抗体和酶标记抗原。本发明的检测瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1的酶联免疫试剂盒为多残留检测试剂盒，对样品的前处理要求低，样品前处理过程简单，能同时快速检测大批样品；最低检测限达0.05 μg·kg^‑1，可直接判断样品是否超标，具有高特异性、高灵敏度、高精确度、高准确度等特点，可在食品瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1残留检测中发挥重要作用。

技术领域

黄曲霉毒素主要由黄曲霉、寄生曲霉、烟曲霉和少数温特曲霉菌株产生，是一组化学结构类似的二呋喃香豆素衍生物。目前，分离鉴定出的天然黄曲霉毒素主要类型为B和G毒素，包括黄曲霉毒素B1( AFB1) 、黄曲霉毒素B2( AFB2) 、黄曲霉毒素G1( AFG1) 、黄曲霉毒素G2( AFG2) ，其中，以黄曲霉素 B1毒性最强。1993 年，国际癌症研究机构定义黄曲霉毒素 B1为一类致癌物，其毒性相当于氰化钾的10倍，砒霜的68倍，尤其对人和动物肝脏具有极强致癌性。毒理学研究表明，黄曲霉毒素的危害还包括导致机体免疫力低下，致畸和致突变 性。根据GB2761—2011食品国家标准《食品中真菌毒素限量》规定，稻谷、糙米、大米及其制品中黄曲霉毒素B1限量为 10μg·kg^-1，小麦、大麦、其他谷物及其制品的限量为 5 μg·kg^-1，婴幼儿配方食品和辅助食品限量为 0.5 μg·kg^-1。欧盟国家规定更加严格，要求加工谷类食品和婴儿食品中黄曲霉毒素B1的含量不能超过 0. 1 μg·kg^-1，但目前，GB2761—2011对于黄酒中黄曲霉毒素B1的限量还没有规定。黄酒是我国特有的一种酿造酒，也是世界三大古酒( 啤酒、黄酒和葡萄酒) 之一。

黄酒主要以稻米、黍米、黑米、小麦、玉米、糯米等为原料酿造而成，因其具有抗氧化、抗衰老、降血压、降胆固醇、代谢和免疫调节等功效，深受国人喜爱。黄酒原料( 如陈粮)、酿造过程、储存环节中都有可能发生黄曲霉毒素污染，因此检测黄酒中黄曲霉毒素含量有其必要性。

目前，食品中应用比较广泛的黄曲霉毒素检测方法有高效液相色谱法( HPLC) 、薄层色谱法( TLC) 、酶联免疫测定法( ELISA) 、液相色谱质谱串联分析技术 ( LC-MS /MS) 等。HPLC 和 LC-MS / MS 方法虽然定量准确，但是样品前处理一般需特定的净化柱，净化柱价格相对较高，同时需要配置价格昂贵的检测仪器，操作人员需专门经过仪器培训，而酶联免疫法只需要全扫描酶标仪，操作简单、快速，灵敏度高，检测人员容易上手，在许多企业和小型检测机构得到了广泛应用。本研究利用酶联免疫检测技术( ELISA) ，以黄酒为样本，检测了本地市场中随机抽取的瓶装黄酒中 AFB1 的含量，并对检测方法进行有效评估。

发明创造内容

本发明的目的是提供一种检测本发明的目的是提供一种检测瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1的酶联免疫试剂盒。

本发明所提供的检测瓶装黄酒中黄曲霉毒素 B1的酶联免疫试剂盒，包括包被抗体、酶标记物。

为了更方便现场监控和大量样本筛查，所述试剂盒还包括A ，B ，C ，D，E，F 试剂液、G试剂液、H试剂液、I试剂液、J试剂液。

所述A ，B ，C ，D，E，F 试剂液为瓶装黄酒中黄曲霉毒素 B1系列浓度标准溶液。

所述G试剂液为酶标记抗原。

所述H试剂液为洗涤液。

所述I试剂液为底物溶液。

所述J试剂液为终止液。

本发明的检测瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1的酶联免疫试剂盒，包括包被瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1抗体和酶标记抗原。