[发明专利]N15多肽在制备细菌抑制剂中的用途

说明书

本发明公开了N15多肽在制备细菌抑制剂中的用途，N15多肽是一个具有15个氨基酸的短肽，它具有多种生物学功能，包括调节NF‑κB转录因子结合目的基因的能力，影响NF‑κB目的基因产物蛋白质的转录和表达；阻断PCNA结合DNA聚合酶，从而阻止细胞DNA合成抑制细胞增殖；抑制上皮细胞增生，调节表皮增生及分化，使皮肤角化过程正常化等，本发明阐述了它新的生物学功能，具有较好的实用性和产业化前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体指N15多肽在制备细菌抑制剂中的用途。

背景技术

人体中存在着很多种类的细菌，其中有些是有益菌，有益菌对维持人体微生环境有着重要的作用，还有些细菌则是致病菌，能引起人类疾病。细菌在人体内寄生，增殖并引起疾病的特性称为细菌的致病性或病原性(pathogenicity)。病原菌的致病作用与其毒力、侵入机体的数量、侵入途径及机体的免疫状态密切相关。例如，大肠杆菌寄居于肠道内，它的单独致病力不大，若和其他致病菌在一起时，可造成严重的混合感染，常见的致病菌还有金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等。

蓝藻之所以又称蓝细菌，是因为蓝藻是最原始、最古老的藻类.其结构简单，无典型的细胞核，所以又称蓝细菌，属于原核生物。已知蓝藻约2000种，中国已有记录的约900种。蓝藻有极大的适应性，分布很广。在一些营养丰富的水体中，有些蓝藻常于夏季大量繁殖，并在水面形成一层蓝绿色而有腥臭味的浮沫，称为“水华”，大规模的蓝藻爆发，被称为“绿潮”(和海洋发生的赤潮对应)。绿潮引起水质恶化，严重时耗尽水中氧气而造成鱼类的死亡。

发明内容

本发明的目的在于提供一种多肽，该多肽能够抑制多种致病菌和蓝藻生长，具有制备细菌抑制剂的用途，它已被现有技术公开，名为N15多肽。

N15多肽是一个具有15个氨基酸的短肽，其序列为甲硫氨酸-脯氨酸-酪氨酸-丝氨酸-苏氨酸-谷氨酸-亮氨酸-异亮氨酸-苯丙氨酸-酪氨酸-异亮氨酸-谷氨酸-甲硫氨酸-天门冬氨酸-脯氨酸，它具有多种生物学功能，包括调节NF-κB转录因子结合目的基因的能力，影响NF-κB目的基因产物蛋白质的转录和表达；阻断PCNA结合DNA聚合酶，从而阻止细胞DNA合成抑制细胞增殖；抑制上皮细胞增生，调节表皮增生及分化，使皮肤角化过程正常化等。

发明人发现在研究中发现N15可以对多种革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、蓝细菌的生长产生抑制作用。经试验检测，N15多肽抑制蓝藻增殖可能是通过抑制DNA复制和异形胞分化基因的表达，起到抑制蓝藻增殖的。

本发明还提供了一种N15多肽制备的抗细菌药物，为N15多肽的水溶液，浓度大于等于100μg/mL。

本发明的有益效果：N15多肽是一种结构清晰，易于工业化生产的多肽，它可以抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、鱼腥蓝细菌等多种细菌的增殖，效果好且无毒副作用。

附图说明

图1为N15对大肠杆菌的抑菌曲线。

图2为流式细胞仪检测N15对金黄色葡萄球菌DNA含量的影响。

图3为N15对鱼腥蓝细菌PCC 7120的抑菌曲线。

图4为缺氮诱导48小时对照组和N15实验组鱼腥蓝细菌PCC7120异形胞的分化情况。

图5为荧光定量RT-PCR检测N15对蓝藻hetR基因mRNA表达量的影响。

图6为荧光定量RT-PCR检测N15对蓝藻ntcA基因mRNA表达量的影响。

具体实施方式

下面结合附图和具体实验例对本发明作进一步的论证说明，以下实验例仅是对本发明的解释而本发明并不局限于以下实验例。

实验例1：N15抑制了大肠杆菌的生长

实验方法：