[发明专利]一种用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合以及应用和方法

权利要求书

1.一种用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合，其特征在于，其包括第1-15引物对，所述第1-15引物对的碱基序列分别如SEQ ID NO.1-2、SEQ ID NO.3-4、SEQ ID NO.5-6、SEQID NO.7-8、SEQ ID NO.9-10、SEQ ID NO.11-12、SEQ ID NO.13-14、SEQ ID NO.15-16、SEQID NO.17-18、SEQ ID NO.19-20、SEQ ID NO.21-22、SEQ ID NO.23-24、SEQ ID NO.25-26、SEQ ID NO.27-28、SEQ ID NO.29-30所示。

2.根据权利要求1所述的用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合，其特征在于，所述第1-15引物对中每个引物对的上游引物的5’端标记有荧光基团；

或者所述第1-15引物对中每个引物对的下游引物的5’端标记有所述荧光基团。

3.根据权利要求2所述的用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合，其特征在于，所述荧光基团为选自FAM、TAMRA、HEX和ROX中的任意一种。

4.权利要求1-3中任一项所述的用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合在构建枸杞DNA指纹图谱中的应用。

5.一种构建枸杞DNA指纹图谱的方法，其特征在于，其包括：用权利要求1-3中任一项所述的用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合的第1-15引物对分别对多个枸杞种质的DNA进行PCR扩增，得到扩增产物；

将所述扩增产物分别进行电泳，得到扩增带型数；

将所述扩增带型数进行编码处理，得到每一种所述枸杞种质的DNA对应所述第1-15引物对的第1-15编号，串联所述第1-15编号形成字符串。

6.根据权利要求5所述的构建枸杞DNA指纹图谱的方法，其特征在于，所述编码处理是指：将所述第1-15引物对中每对引物对对应的所述扩增带型数按照升序排列，并按顺序标号，当序号数小于9时，用数字1-9顺序表示，当序号数大于9时，用英文字母A-Z顺序表示。

7.根据权利要求5所述的构建枸杞DNA指纹图谱的方法，其特征在于，串联所述第1-15编号形成所述字符串是指：按第3编号、第5编号、第7编号、第11编号、第13编号、第8编号、第10编号、第14编号、第1编号、第15编号、第12编号、第4编号、第2编号、第9编号、第6编号的顺序进行串联形成所述字符串。

8.根据权利要求5-7中任一项所述的构建枸杞DNA指纹图谱的方法，其特征在于，所述构建枸杞DNA指纹图谱的方法还包括：利用二维码技术将所述字符串形成二维码图形。

9.根据权利要求5-7中任一项所述的构建枸杞DNA指纹图谱的方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，10个循环；95℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环；95℃变性30s，53℃退火30s，72℃延伸30s，10个循环；72℃5min。

10.由权利要求5-9中任一项所述的构建枸杞DNA指纹图谱的方法所得到的枸杞DNA指纹图谱在鉴定枸杞种质资源中的应用。