[发明专利]抗乙型肝炎病毒的递送系统和生物制剂

权利要求书

1.靶向HBV基因保守区域的sgRNA分子，其具有如下核酸序列之一：

GAGGTGAAGCGAAGTGCACA(SEQ ID NO:1)；

CCACCCAAGGCACAGCTTGG(SEQ ID NO:2)

CGGGGAGTCCGCGTAAAGAG(SEQ ID NO:3)

AAGCCACCCAAGGCACAGCT(SEQ ID NO:4)

GAAGCGAAGTGCACACGGTC(SEQ ID NO:5)

AGAAGATGAGGCATAGCAGC(SEQ ID NO:6)

CAAGCCTCCAAGCTGTGCCT(SEQ ID NO:7)

GGGGCGCACCTCTCTTTACG(SEQ ID NO:8)

GGACTTCTCTCAATTTTCTA(SEQ ID NO:9)；或

TCCTCTGCCGATCCATACTG(SEQ ID NO:10)。

2.脂质纳米颗粒，由脂多肽分子、二油酰基磷脂酰乙醇胺、胆固醇和聚乙二醇以15:25:45:0.75或15:30:40:0.75的摩尔比构成，其中所述脂质纳米颗粒包裹Cas9mRNA和如权利要求1中所述的sgRNA分子，并且其中Cas9mRNA和/或sgRNA与脂多肽分子的质量比范围为(1:10)–(1:5)。

3.根据权利要求2所述的脂质纳米颗粒，其中，所述脂多肽分子为1,3,5-三(N¹,N³,N⁵-(3-双十二烷氨基丙基)苯甲酰胺(TT3)，所述聚乙二醇为PEG2000，所述sgRNA分子为如权利要求1中所述的sgRNA分子。

4.根据权利要求2或3所述的脂质纳米颗粒，其中，所述脂多肽分子为脂多肽的多聚体。

5.根据权利要求2或3所述脂质纳米颗粒，其中，Cas9mRNA和sgRNA与脂多肽分子的质量比范围为1:10。

6.根据权利要求2或3所述的脂质纳米颗粒，其中，所述脂质纳米颗粒的半径为80-160nm。

7.根据权利要求6所述的脂质纳米颗粒，其中，所述脂质纳米颗粒的半径为80-120nm。

8.包含如权利要求2至7中任一项所述脂质纳米颗粒、Cas9mRNA和如权利要求1中所述的sgRNA分子，以及药学上可接受的赋形剂和辅料的药物组合物。

9.脂质纳米颗粒的制备方法，所述方法包括：

(i)将脂多肽分子、二油酰基磷脂酰乙醇胺、胆固醇和聚乙二醇溶于酒精中，得到第一溶液；并将Cas9mRNA和/或sgRNA分子溶于水，得到第二溶液；

(ii)在微流装置中混合所述第一溶液和所述第二溶液，形成所述脂质纳米颗粒。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述脂多肽分子为1,3,5-三(N¹,N³,N⁵-(3-双十二烷氨基丙基)苯甲酰胺(TT3)，所述聚乙二醇为PEG2000，所述sgRNA分子为如权利要求1中所述的sgRNA分子。

11.一种治疗乙型肝炎的方法，所述方法包括向受试者给予有效量的如权利要求1-7所述脂质纳米颗粒或权利要求8所述药物组合物的步骤。