[发明专利]一种能利用淀粉并分泌抗菌肽的重组酿酒酵母有效
申请号: | 201611186883.5 | 申请日: | 2016-12-20 |
公开(公告)号: | CN106591351B | 公开(公告)日: | 2018-07-24 |
发明(设计)人: | 祝永华;巩新民;原新廷;殷铭斌;唐友;康小龙;张宏刚 | 申请(专利权)人: | 山东益生种畜禽股份有限公司;广州格拉姆生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N1/19;C12N15/66;C12N15/56;C12N15/12;C12R1/865 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 胡辉;舒胜英 |
地址: | 264008 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗菌肽 分泌 重组酿酒酵母 淀粉 抗菌肽基因 淀粉基料 降解 淀粉酶 餐厨废弃物 淀粉降解酶 淀粉酶基因 共表达载体 糖化酶基因 淀粉降解 工业酒精 基因重组 降解淀粉 酵母菌体 菌体生长 酿酒酵母 生产乙醇 饲料添加 抑制杂菌 重组酵母 生长 多基因 共表达 糖化酶 重组菌 构建 酒精 转化 生产 | ||
1.一种酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述载体中含有α-淀粉酶基因、糖化酶基因、抗菌肽基因;
所述α-淀粉酶基因的碱基序列如SEQ ID NO:1所示;
所述糖化酶基因的碱基序列如SEQ ID NO:2所示;
所述抗菌肽基因选自菌丝霉素、鲶鱼抗菌肽突变体、乳铁蛋白肽、脆皮蛙的抗菌肽突变体;
所述菌丝霉素的碱基序列如SEQ ID NO:3所示;
所述鲶鱼抗菌肽突变体的碱基序列如SEQ ID NO:4所示;
所述乳铁蛋白肽的碱基序列如SEQ ID NO:5所示;
所述脆皮蛙的抗菌肽突变体的碱基序列如SEQ ID NO:6所示。
2.根据权利要求1所述的一种酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述α-淀粉酶基因、糖化酶基因、抗菌肽基因上游均引入α-信号肽基因序列,α-信号肽基因的碱基序列如SEQ ID NO:7所示。
3.根据权利要求1所述的一种酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述α-淀粉酶基因的启动子为pgk1-1,其碱基序列如SEQ ID NO:8所示,终止子为pgkt1-1,其碱基序列如SEQ ID NO:9所示;
所述糖化酶基因的启动子为pgk1-2,其碱基序列如SEQ ID NO:10所示,终止子为pgkt1-2,其碱基序列如SEQ ID NO:11所示;
所述抗菌肽基因的启动子为pgk1-3,其碱基序列如SEQ ID NO:12所示,终止子为pgkt1-3,其碱基序列如SEQ ID NO:13所示。
4.根据权利要求1所述的一种酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述载体的筛选基因中含有G418抗性基因。
5.根据权利要求1~4任一所述的一种酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述载体的骨架为pGAPZaA质粒。
6.根据权利要求1所述的一种酿酒酵母多基因共表达载体,其特征在于:所述载体中含有酿酒酵母菌的25S rDNA基因片段,其碱基序列如SEQ ID NO:15所示。
7.一种能高效利用淀粉并分泌抗菌肽的重组酿酒酵母,其特征在于,所述重组酿酒酵母基因组中插入有权利要求1~6任一所述的多基因共表达载体。
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