[发明专利]一种雪峰虫草子座及其人工培育方法

权利要求书

1.一种雪峰虫草子座的人工培育方法，其特征在于：所述雪峰虫草子座稍圆柱状，顶部常见尖状或圆钝，不分枝或顶部有短分枝，浅暗黄褐色；所述雪峰虫草子座的人工培育方法的步骤如下：

1)母种的制备：雪峰虫草菌或野生子座或培育成功后获得的子座进行组织分离，取子座2～4mm长度的接种量接入斜面培养基，25～28°C，空气相对湿度60～90％，暗培养15～25天，至菌丝长满斜面，挑取基生菌丝发达且转成黄色的斜面作为母种，所述斜面培养基的原料组成为每1000mL培养基中加入200g马铃薯的滤液，蔗糖20g，蛋白胨2g，KNO31g，KH2PO41g，MgSO4·7H2O0.5g，琼脂15-20g和余量的水；

2)二级母种的制备：将步骤1)得到的所述母种按黄豆大小的菌块接入斜面培养基中继续培养或复壮，于25～28°C，空气相对湿度60～90％时，暗培养15～30天，至菌丝长满斜面，挑取基生菌丝发达且转成黄色的斜面作为二级母种；

3)一级菌种的制备：将步骤2)得到二级母种按每100mL培养基接入1～2块黄豆大小的菌块的接种量接种至液体培养基中，于25～28°C，以130～150r/min的转速震荡培养13～20天，挑选菌丝球大小均匀一致、直径为2～3mm的菌种作为一级菌种；

4)生产种的制备：将步骤3)得到一级菌种按液体培养基体积5～10％的接种量接入液体培养基中，于25～28°C，以130～150r/min的转速震荡培养7～10天，挑选菌丝球大小均匀一致、直径为2～3mm的菌种作为生产种，所述的液体培养基与步骤3)的培养基相同；

5)雪峰虫草子座的制备：在无菌环境条件下，将步骤4)得到的生产种用无菌水稀释到5倍，再按每1L生产种接种到3～6kg生产用培养基的比例进行接种，在20～25°C，空气相对湿度60～90％时，暗培养18～23天，至菌丝长满培养基，再在5～10°C12h，20～25°C12h，避光条件下，长出子座，转入20～25°C弱光培养培养60～90天，至子座长至8～12cm，即可采收，得到雪峰虫草子座；

所述雪峰虫草菌于2015年08月10日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCCNO.11107。

2.根据权利要求1所述的一种雪峰虫草子座的人工培育方法，其特征在于：所述雪峰虫草子座由雪峰虫草菌或其新鲜子座进行组织分离后人工培育而获得。

3.根据权利要求2所述的一种雪峰虫草子座的人工培育方法，其特征在于：所述的新鲜子座是野生的或由人工培育成功后获得的。

4.根据权利要求1所述的一种雪峰虫草子座的人工培育方法，其特征在于：步骤1)中所述斜面培养基的制备方法是按原料组成分别称量各组分后，把马铃薯去皮切小长条，加水煮沸20～30分钟左右至马铃薯软而不烂时，用3～4层纱布过滤，滤液在加热状态下与其余组分混合搅拌均匀，趁热装于试管灭菌后，待冷却至40°C制成斜面，所述斜面培养基pH6.5～7.0。

5.根据权利要求1所述的一种雪峰虫草子座的人工培育方法，其特征在于：步骤3)所述的液体培养基的原料组成为每1000mL培养基中含200g马铃薯的滤液，蔗糖20g，蛋白胨2g，KNO31g，KH2PO41.0g，MgSO4·7H2O0.5g和余量的水，所述的液体培养基pH6.5～7.0。

6.根据权利要求1所述的一种雪峰虫草子座的人工培育方法，其特征在于：步骤5)所述的生产用培养基的原料组成为每1kg大米配200～300g蚕蛹粉和2～3L液体培养基，所述的生产用培养基pH6.5～7.0。