[发明专利]蛹虫草提取物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种蛹虫草提取物及其制备方法和应用，属于天然活性产物技术领域。该制备方法包括以下步骤：制备醇提物：取蛹虫草，加入体积百分浓度为80‑100％的乙醇水溶液作为提取溶剂，加热提取，然后去除固体不溶物，得醇提液，回收所述醇提液中的溶剂，得醇提物，即为蛹虫草提取物。采用上述方法制备得到的蛹虫草提取物，对蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)的抑制作用，可用于开发制备降血糖、防治胰岛素抵抗、糖尿病的药物中。

技术领域

本发明涉及天然活性产物技术领域，特别是涉及一种蛹虫草提取物及其制备方法和应用。

背景技术

糖尿病(Diabetes mellitus，DM)是一种以高血糖为特征的慢性代谢性疾病。近年来，社会不断进步，人民生活水平不断提高，糖尿病的发病率也不断升高，糖尿病已经成为严重危害人类生命健康的恶性疾病之一，临床上以高血糖为主要特点。我国目前糖尿病的总体患病率已达9.7％，同期糖尿病前期的患病率高达15.5％。根据调查结果所做出的推算显示，我国总糖尿病患病人数达9千 2百万以上，糖尿病前期人数达1亿4千8百万以上。

近年来的研究发现，蛋白酪氨酸磷酸酶(Protein Tyrosine Phosphatase，PTP)与2型糖尿病的胰岛素信号传导、高血脂、肥胖密切相关。PTPs家族可分为 8个亚族：①酪氨酸特异性PTPs，②双特异性PTPs，③细胞分裂周期蛋白 25(cdc25)亚族，④第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN) 亚族，⑤Myotubularins，⑥再生肝磷酸酶(PRL)亚族，⑦低分子量PTPs，⑧新发现的cdc14亚族。其中，与胰岛素信号调节紧密相关的是酪氨酸特异性 PTPs。PTP1B是胞内PTPs的代表，是第一个被鉴定并纯化的哺乳动物PTP，广泛表达于肌肉、心、肝、肾、脑等各种组织中。

PTP-1B在胰岛素抵抗中发挥了重要的作用，是胰岛素信号转导中一个十分关键的分子，可以负性调节胰岛素和瘦素的信号转导。胰岛素信号传导首先需要胰岛素与胰岛素受体结合。胰岛素受体是由α₂β₂亚单位组成的四聚体，α亚单位与胰岛素结合后β亚单位的酪氨酸及胰岛素受体底物发生磷酸化而被激活。磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kianse，PI3K)等下游蛋白也被活化，葡萄糖转运蛋白4由细胞内转至细胞膜，最终葡萄糖进入细胞。在上述过程中的磷酸化反应可以被PTP-1B等因子逆转，从而阻止胰岛素信号的传导。如果PTP-1B结构或活性改变，将改变其对胰岛素信号传导的抑制作用。

外周组织胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能受损是2型糖尿病发病机制的两个基本条件，而胰岛素信号传导被抑制是胰岛素抵抗的重要环节。PTP-1B升高表达可引起胰岛素抵抗，从而引发2型糖尿病。有资料表明，PTP-1B的表达水平在发生糖尿病或胰岛素抵抗时明显升高。使转基因鼠表达人PTP-1B的有关研究中发现，与对照组相比，实验组鼠肌肉中胰岛素刺激引起的胰岛素受体酪氨酸磷酸化水平降低35％，PI3K活性降低40％～60％，葡萄糖转运所需的蛋白激酶c活性也减弱；表达PTP-1B的小鼠全身葡萄糖清除和肌肉的葡萄糖摄取减少了40％～50％。并有研究表明体重指数正常的初诊2型糖尿病较正常对照者存在明显的胰岛素抵抗，而PTP-1B在前者内脏脂肪组织中的表达较后者显著增高，几乎是后者的4倍。可见内脏脂肪组织PTP-1B的表达升高在胰岛素抵抗中也有重要作用。另有研究报道采用PTP-1B反义寡核苷酸处理糖尿病模型小鼠(ob/ob小鼠)，抑制其PTP-1B表达，发现在肝、脂肪和骨骼肌内PTP-1B的表达下调时，ob/ob小鼠血糖恢复正常，与糖代谢有关的各个指标也都趋于正常。

以上结果说明，PTP-1B在拮抗胰岛素信号传导中具有重要作用。糖尿病患者体内PTP，尤其是PTP-1B的含量及活性的异常可能存在多方面的原因，基因变异被认为是主要因素。有研究表明，先用限速酶AVAI对653个样本的一种单核苷酸多肽链消化，再利用外显子PCR放大技术对其编码发现，带有 PTP981T/981C基因型的人群患2型糖尿病的概率大大增加。