[发明专利]一种动物组织样品简易研磨方法

说明书

技术领域

本发明涉及组织样品研磨领域，特别是涉及一种动物组织样品简易研磨方法。

背景技术

目前，动物实验过程中需要将动物组织如：脾、肝等组织切碎研磨，用以检测化验。常用的组织研磨器具有电动组织研磨器、玻璃组织研磨器、研钵等，各种研磨装置操作各有不同，都可以达到研磨效果，但是这些装置都属专业器材，需要从专业器材商处购买，操作条件严格，一般在专业实验室应用，不适合在基层一线使用。

发明内容

本发明的目的是解决现有组织样品研磨技术中存在的部分问题，提供一种动物组织样品简易研磨方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种动物组织样品简易研磨方法，包括如下步骤：

(1)将处理后的瓶盖朝上放置桌面，移取样品处理液置于瓶盖内；

(2)将前处理过的铜网置于瓶盖内；

(3)取组织样品放于步骤(2)的铜网中央；

(4)手拿离心管，管盖朝下，前后挤压研磨组织样品；

(5)研磨完毕，取走铜网，瓶盖中即为组织样品细胞混悬液。

优选地，所述步骤(1)中的处理为先用自来水冲洗，然后用蒸馏水或矿泉水冲洗。

优选地，所述步骤(1)中的样品处理液为裂解液或缓冲液。

优选地，所述样品处理液的体积为200-400uL，采用移液枪移取。

优选地，所述步骤(2)中的前处理为高压灭菌后烘干；所述铜网为80目。

优选地，所述步骤(3)中组织样品的体积为黄豆粒大小。

优选地，所述步骤(4)中研磨次数为8-15次。

优选地，所述步骤(4)中研磨次数为10次。

优选地，所述步骤(4)中研磨时需要用眼科镊固定铜网；所述眼科镊需要高压灭菌烘干后使用。

优选地，所述步骤(5)中的瓶盖用84消毒液浸泡2小时后，依次经自来水、蒸馏水或矿泉水冲洗后回收待用。

本发明的有益效果：本发明取材容易：瓶盖易得，铜网市场易购买，而常规方法所用研磨器、匀浆仪及其耗材只能从专业器材商处购买；成本低：铜网、瓶盖较研磨器、匀浆仪及其耗材价格便宜；处理方便，耗时短；效果与常规方法相当。本申请的研磨过程在室温下即可，对温度没有特殊要求，易于操作。研磨质量与目数有关系，实验证明80目铜网为最合适网孔，所以选择80目。80目铜网为市售铜网，应该是标准规格。由于铜网软硬度合适，所以只选铜网。瓶盖材质无要求，瓶盖一般都耐酸碱，搜集矿泉水瓶或饮料瓶瓶盖即可，其中新开矿泉水瓶盖可直接使用，饮料瓶盖可经自来水冲洗，然后蒸馏水或矿泉水冲洗即可使用，耗材简单，节省费用。

具体实施方式

为了更好地说明本发明，下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。

一种动物组织样品简易研磨方法，包括如下步骤：

(1)将处理后的瓶盖朝上放置桌面，移取样品处理液置于瓶盖内；

(2)将前处理过的铜网置于瓶盖内；

(3)取组织样品放于步骤(2)的铜网中央；

(4)手拿0.5mL离心管，管盖朝下，前后挤压研磨组织样品；

(5)研磨完毕，取走铜网，瓶盖中即为组织样品细胞混悬液，把瓶盖中组织样品细胞混悬液用移液器全部吸入1.5mL离心管中即可进行下一步核酸提取实验，或者放入4摄氏度冰箱保存备用，保存时间不超过24小时，建议处理后立即提取核酸。

所述步骤(1)中的处理为先用自来水冲洗，然后用蒸馏水或矿泉水冲洗。

所述步骤(1)中的样品处理液为裂解液或缓冲液。所述样品处理液的体积为200uL或400uL，例如400uL裂解液(提取RNA，该裂解液为本领域常规裂解液即可)，200uL磷酸缓冲盐溶液(PBS缓冲液，提取DNA)；采用移液枪移取。所述步骤(2)中的前处理为高压灭菌后烘干；所述铜网为80目，按照瓶盖大小剪成圆形或方形，以小于瓶盖内圆直径为宜。所述步骤(3)中组织样品的体积为黄豆粒大小，组织样品冰柜取出后，直接剪下所需大小即可。所述步骤(4)中研磨次数平均为10次。所述步骤(4)中研磨时需要用眼科镊固定铜网；所述眼科镊需要高压灭菌烘干后使用。所述步骤(5)中的瓶盖用84消毒液浸泡2小时后，依次经自来水、蒸馏水或矿泉水冲洗后回收待用；所述84消毒液的浓度为原液/水的体积比为1：9。本方法中的离心管均需高压灭菌烘干后使用。上述研磨过程在室温下即可，对温度没有特殊要求。

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