[发明专利]一种升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品的制备方法

说明书

本发明公开了一种升麻素苷和5‑O‑甲基维斯阿米醇苷对照品的制备方法。具体地，本发明的方法包括以下步骤：(i)提供升麻素苷和5‑O‑甲基维斯阿米醇苷的醇提混合物；(ii)所述的醇提混合物与溶剂混合，得到第一混合物，并利用中压制备柱分离所述的第一混合物，从而获得升麻素苷粗品和5‑O‑甲基维斯阿米醇苷粗品；和(iii)利用溶剂对升麻素苷粗品和/或5‑O‑甲基维斯阿米醇苷粗品进行重结晶，从而获得升麻素苷对照品和/或5‑O‑甲基维斯阿米醇苷对照品。本发明可实现升麻素苷和5‑O‑甲基维斯阿米醇苷的同步分离，制备量大，收率高、产品纯度高，适合工业化生产。

技术领域

本发明属于中药现代化技术领域，涉及一种中药化学对照品的制备方法，具体来说，本发明提供了一种从防风药材中分离高纯度升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品的方法。

背景技术

防风为伞形科植物防风Saposhnikovia divaricata(Turcz.)Schischk.未抽花茎的干燥根。现今主要分布于黑龙江、内蒙古、辽宁、吉林、河北和山东等地，分布较广适应性强，为我国最常用的传统中药之一，味辛苷，性温，归膀胱、肝、脾经，具有解表祛风、胜湿、止痉的功效。主治外感风寒、头痛目眩、周身尽痛、风寒麻痹、骨节疼痛、四肢挛急等症。

升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷是在2010年版一部中收载的指标成分，升麻素苷(Prim-O-glucosylcimifugin)，分子式为C₂₂H₂₈O₁₁，5-O-甲基维斯阿米醇苷(5-O-methylvisamminolβ-D-glucopyranoside)，分子式为C₂₂H₂₈O₁₀，它们的结构式如下：

针对防风组成的中药制剂(如辛夷鼻炎丸、玉屏风散、童康平等)中升麻素苷和5-O甲基维斯阿米醇苷的检测方法的专利较多，如申请号201310504883.5的专利申请公开“辛夷鼻炎丸含量的测定方法”。而目前国内关于升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品的分离纯化文献报道很少，加之，升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷已在2010版药典中被列为标准，这两种对照品的需求量越来越大，尤其5-O-甲基维斯阿米醇苷在药材中含量很低，从药材中分离出单体非常困难，因此从防风中分离纯化升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品显得非常必要，具有广泛的应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品的分离纯化方法。该方法不但可实现升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品的同步分离，且分离效率高，工艺稳定，成本低廉，可大量制备得到纯度大于99％的升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品。

本发明的第一方面提供了一种升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品的制备方法，所述的方法包括以下步骤：

(i)提供升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的醇提混合物；

(ii)所述的醇提混合物与溶剂混合，得到第一混合物，并利用中压制备柱分离所述的第一混合物，从而获得升麻素苷粗品和5-O-甲基维斯阿米醇苷粗品；和

(iii)利用溶剂对升麻素苷粗品和/或5-O-甲基维斯阿米醇苷粗品进行重结晶，从而获得升麻素苷对照品和/或5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品。

在另一优选例中，所述步骤(ii)还包括步骤：

(ii-1)以30-35％(v/v)甲醇溶液作为中压制备柱的第一洗脱剂，进行第一阶段洗脱，浓缩洗脱液以获得升麻素苷粗品；和

(ii-2)以45-50％(v/v)甲醇溶液作为中压制备柱的第二洗脱剂，进行第二阶段洗脱，浓缩洗脱液以获得5-O-甲基维斯阿米醇苷粗品。