[发明专利]一种用于检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的组合物、试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种用于检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的组合物、试剂盒及其检测方法，所述组合物由多肽以及对照品检测基质组成，所述多肽的氨基酸序列为Gln‑Gly‑Pro‑Ser‑Gly‑Thr‑Ser‑Gly‑Glu‑Arg，对照品检测基质为鱼骨胶。本发明的多肽为狗骨所特有，通过检测该多肽来判断是否含有狗源性成分，通过加入对照品检测基质来实现狗源性成分含量的精确检测。该方法具有含量检测准确、操作快捷的优点，在胶类中药及其复方制剂产品质量监控领域将具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种用于检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的组合物、试剂盒及其检测方法。本发明属于医药检测技术领域。

背景技术

狗骨为为犬科动物狗的骨骼，具有健脾和络、活血生肌的功效，主治风湿痹痛、腰腿无力、四肢麻木、久痢、疮瘘。以狗骨为主药制成的制剂有狗骨胶、狗骨胶药酒、复方狗骨胶、壮骨伸筋胶囊、驳骨丸等。目前狗骨的鉴别主要为性状鉴别和显微鉴别，因专属性不强，常存在鉴别不准确等情况，对于用狗骨加工后的产品无法鉴别，更无法定量检测。因为缺乏专属性鉴别方法和定量方法，部分不法厂家进行造假或掺假，以降低成本获得非法利润。

因此，目前迫切需要提出一种能够快速、准确检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的方法，进而实现对含狗骨源成分的产品的真伪鉴定。本发明从狗骨中主要成分出发，利用所含蛋白的氨基酸序列不同，找出狗骨特征性肽段，利用狗骨的特征肽段实现胶类中药及其复方制剂中狗骨源性成分含量的检测。

发明内容

本发明的一个目的在于，提供一种能够快速、准确鉴定胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的组合物。

本发明的另一个目的在于，提供一种能够快速、准确鉴定胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的试剂盒。

本发明的再一个目的在于，提供一种能够快速、准确鉴定胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种用于检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的组合物，所述组合物由多肽及对照品检测基质组成，所述多肽的氨基酸序列为Gln-Gly-Pro-Ser-Gly-Thr-Ser-Gly-Glu-Arg(SEQIDNO.1所示)，对照品检测基质为鱼骨胶。

含有所述组合物的检测试剂盒也在本发明的保护范围之内。

本发明进一步提供了一种用于检测胶类中药及其复方制剂中狗骨源成分含量的方法，具体包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备

1)基质溶液的制备：将称量好的对照品检测基质置于量瓶中，加入NH₄HCO₃溶液，超声使样品完全溶解，加NH₄HCO₃溶液稀释至刻度；

2)对照品母液的制备：将称量好的对照品检测基质置于量瓶中，加入NH₄HCO₃溶液，超声使样品完全溶解，将称量好的的多肽放入该量瓶中，用NH₄HCO₃溶液溶解并稀释至刻度；

3)对照品溶液制备：以步骤1)制得的基质溶液为溶剂，将步骤2)制得的对照品母液稀释，微孔滤膜过滤，续滤液中加胰蛋白酶溶液，酶解；

(2)待检测样品溶液的制备

将称量好的待测胶类中药置于量瓶中，加NH₄HCO₃溶液，超声使胶类中药完全溶解，加NH₄HCO₃溶液稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜过滤，续滤液中加胰蛋白酶溶液，酶解；

(3)液质联用仪检测