[发明专利]大樱桃砧木大青叶的繁殖方法

权利要求书

1.一种大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于所述繁殖方法包括以下步骤：

第一步芽茎处理：采大青叶枝条，去掉所有叶片后用洗洁净洗净表面，自来水冲洗25分钟后置于工作台上，用70％～75％酒精灭菌1～2分钟，再用0.1％升汞浸泡5～10分钟，无菌水冲洗10次后切带芽茎段备用；

第二步培养基选择：选取MS基本培养基，蔗糖浓度取1～5％，琼脂0.5～0.8％，PH值为6.0。培养室温度25℃，光强1500～2000Lx，每天光照10～15小时；

第三步接种：将外植体接种在MS+6—BA 0.3～0.7mg/L+NAA 0.1～0.5mg/L的培养基上进行初始培养，3～5天后将初始培养诱导的芽苗转入MS+6—BA 0.3～0.6mg/L+NAA0.15～0.25mg/L的培养基上增殖，增殖培养2～3周后，取1.5～2.0cm新梢转移到1/2MS+NAA 0.4～0.7mg/L+15～25g蔗糖的生根培养基上，每天红光照射8～12小时，培养20天左右；

第四步炼苗：取出生根的试管苗，洗净粘附的培养基，移载到混合基质中，放在温室中的小拱棚炼苗，拱棚温度控制在21℃～23℃，相对湿度在移栽培养初期为90％以及以上；

第五步移栽：温室培养30～45天后，露天培养4～9天，移栽于大田苗圃。

2.根据权利要求1所述的大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于：芽茎处理时用70％酒精灭菌90秒，再用0.1％升汞浸泡8分钟。

3.根据权利要求1所述的大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于：蔗糖浓度取2％，琼脂0.6％，PH值为6.0。培养室温度25℃，光强1800Lx，每天光照12小时。

4.根据权利要求1所述的大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于：接种时将外植体接种在MS+6—BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L的培养基上进行初始培养，4天后将初始培养诱导的芽苗转入MS+6—BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L的培养基上增殖，增殖培养15天后，取1.8cm新梢转移到1/2MS+NAA 0.5mg/L+18g蔗糖的生根培养基上。

5.根据权利要求1所述的大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于：步骤三中红光波长为610～720nm。

6.根据权利要求5所述的大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于：步骤三中红光波长为660nm。

7.根据权利要求1所述的大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于：步骤三中所用红光灯为LED灯。

8.根据权利要求1所述的大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于：步骤三中所述红光照射时间为10小时。

9.根据权利要求1所述的大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于：炼苗时拱棚温度控制在22℃，相对湿度在移栽培养初期为91％。

10.根据权利要求1所述的大樱桃砧木大青叶的繁殖方法，其特征在于：移栽时温室培养40天后，露天培养8天。