[发明专利]一种北美海棠的组织培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及海棠的组织培养技术领域，具体为一种北美海棠的组织培养方法。

背景技术

北美海棠通过从美国引种，又称美国海棠，中国已拥有了一批新的海棠品种，并在北方城市绿化中得以应用。这批美国海棠品种都具有很好的观赏效果，既可观花又可观果，耐寒性强，适合在中国北方种植。主要品种有“道格”海棠、“火焰”海棠、“宝石”海棠、“凯尔斯”海棠、“粉芽”海棠、“绚丽”海棠、“红玉”海棠、“红丽”海棠、“王族”海棠、“雪球”海棠、“钻石”海棠、“草莓果冻”海棠等。其中“红玉”海棠为垂枝的品种，“凯尔斯”为重瓣花的新品种，“王族”海棠叶色紫红，是观花观叶的优秀品种。这些海棠的花期为4月下旬，花色极为丰富，主要体现在白色、粉色、紫色、红色等色系中，有不同色深及冷暖色调差异。美国海棠抗性强、耐寒、耐极薄，管理容易，观赏效果好，在园林绿化中适于列植于道路两旁，亦可孤植、丛植于草坪上或点缀于岩石旁、湖水边。可以通过组织培育的方式实现对北美海棠的快速培育，实现种苗的大批量获取。

发明内容

本发明的目的在于提供一种北美海棠的组织培养方法，该北美海棠的组织培养方法具体步骤如下：

S1：培养基的制作，采用MS培养基作为培养基体，培养基的制作需要在无菌环境下进行，且MS培养基的PH值控制在5.6-6.0；

S2：繁殖枝条的处理：

1）对北美海棠植株的选择，选择北美海棠植株时需要注意避免选择有病变的植株体，

2）选择表面较为洁净的枝条作为备选材料，备选枝条不仅需要洁净要求，同时需要注意枝条上需要有至少3个腋芽，

3）对枝条的剪切，将确定选择的枝条剪切下来，剪切时注意避免对枝条上腋芽和表皮破坏，

4）枝条的清洁，将枝条放入到流动水下进行反复的冲洗，流动水下冲洗后，采用硫磺消毒肥皂水用软毛刷蘸取对枝条表皮进行洗刷，注意保护表皮完好，尤其需要注意对腋芽进行保护，

5）流动水的再次冲洗，采用流动水将枝条上的肥皂沫冲洗干净；

S3：繁殖块的处理：

1）将冲洗洁净的枝条在洁净无菌工作台上切成1-1.5厘米的小段，同时小段上必须带有腋芽，且腋芽处于距离顶端三分之一处，

2）将切好的繁殖块在75％酒精中进行消毒处理，消毒时间为6-8秒，然后将消毒后的繁殖块在无菌水下冲洗，将酒精冲洗去，在浓度为0.08％氯化汞溶液中进行二次消毒处理，消毒时间为15-25秒，消毒结束后再在无菌水下反复冲洗，将残留的氯化汞溶液冲洗干净，利用洁净无菌吸水纸将繁殖块表面水份去除，

S4：从芽诱导和繁殖阶段，将消毒后的繁殖块放入到MS培养基中进行从芽诱导和繁殖，同时需要向MS培养基中加入浓度为1.0 mg/L的6-BA 和1.5 mg/L的NAA ，6-BA和NAA的重量组份比为1:1，加入培养基中以覆盖培养基表面1㎜为准，在无菌环境下进行培育，直至可以明显的观测到丛生芽为止；

S5：丛生芽的分化培育阶段，将繁殖块取出，将丛生芽切下，换入到新的MS培养基中进行分化培育，同时需要向MS培养基中加入浓度为3.0 mg/L的6-BA 和0.3 mg/L的IAA，6-BA和IAA的重量组份比为2:1，加入培养基中以覆盖培养基表面0.5㎜为准，继续培育直到出现真根；

S6：溶液的培养，在培养基中培养出现真根后转入到去除琼脂的MS培养基溶液中进行培养，从而真根可以更好的生长，转入到培养基溶液中培养一周后可以进行土壤中的栽培，完成北美海棠的组织培养。

优选的，所述对枝条剪切以后繁殖块的剪切中，需要注意切口的平齐，切口需要保持平整，避免毛口切面的发生。

优选的，所述在酒精和氯化汞中消毒需要注意消毒时间，避免消毒时间过久导致组织的损坏。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明采用繁殖块与丛生芽的分布培育方式，通过更换培养基的方式来进行培养，大大提高繁殖块的生根概率，提高组织培育的科学性，大大提高北美海棠的培育效果。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

一种北美海棠的组织培养方法，该北美海棠的组织培养方法具体步骤如下：

S1：培养基的制作，采用MS培养基作为培养基体，培养基的制作需要在无菌环境下进行，且MS培养基的PH值控制在5.6；